西瓜枯萎病菌的快速检测及鉴定.pdfVIP

生物技术通报 ·技术与方法· BIOTECHNOLOGY BULLETIN ( ) 2015, 31 7 :58-63 西瓜枯萎病菌的快速检测与鉴定 曹月霞  凌键  谢丙炎  杨宇红 （中国农业科学院蔬菜花卉研究所，北京 100081） 摘 要 ： 通过西瓜枯萎病菌与其他专化型枯萎病菌及瓜类几种重要病原菌的比较基因组分析，获得了西瓜枯萎病菌的基因 组特异序列。在此基础上，设计出特异引物，筛选可扩增出西瓜枯萎病菌特异性DNA 条带的引物。将特异性引物和尖孢镰刀菌专 化型的通用引物W106R/W106S 结合，建立双重PCR 检测体系。该双重PCR 检测体系可以在一次PCR 反应中快速、准确的检测出 西瓜枯萎病菌，为通过分子方法快速鉴定西瓜枯萎病菌提供技术支持。 关键词 ： 西瓜枯萎病菌；双重PCR ；尖孢镰刀菌 DOI ：10.13560/ki.biotech.bull.1985.2015.07.009 Rapid Detection and Identification of Fusarium oxysporum f. sp. niveum Cao Yuexia Ling Jian Xie Bingyan Yang Yuhong （ ， ， 100081 ） Institute of Vegetable and Flowers Chinese Academy of Agricultural Sciences Beijing Abstract: Based on the genome comparison analysis between Fusarium oxysporum f. sp. niveum （Fon）and other closely-related pathogens, the specific sequences of Fon were obtained. Then we developed specific primers that could amplify Fon-specific DNA bands. Combined the Fon-specific primers with the universal primer of （W106R/W106S）, we established a duplex PCR method Fusarium oxysporum that might rapidly and accurately detect Fon by 1 PCR reaction, which is beneficial to technically support the rapid identification of Fon by method of molecular detection.. : f. sp ；duplex PCR ； Key words Fusarium oxysporum . niveum Fusarium oxysporum 西瓜枯萎病俗称蔓割病或萎蔫病，是由尖孢镰 上公认的西瓜枯萎病菌有 3 个生理小种，即生理小 刀菌西瓜专化型（Fusarium oxysporum f. sp. niveum ） 种 0 号、1 号和 2 号，其中 2 号生理小种的侵染性 引起的一种世界性瓜类土传病害 ［1-3］