重组SOD在毕赤酵母中表达的发酵工艺研究.pdfVIP

第４１卷 第６期 福州大学学报（自然科学版） Ｖｏｌ．４１Ｎｏ．６ ２０１３年１２月 ＪｏｕｒｎａｌｏｆＦｕｚｈｏｕＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（ＮａｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅＥｄｉｔｉｏｎ） Ｄｅｃ．２０１３ ＤＯＩ：１０．７６３１／ｉｓｓｎ．１０００－２２４３．２０１３．０６．１１２６ 文章编号：１０００－２２４３（２０１３）０６－１１２６－０５ 重组 ＳＯＤ在毕赤酵母中表达的发酵工艺研究 陈躬瑞，杨坤宝，郑屹峰，饶平凡，刘树滔 （福州大学生物工程研究所，福建 福州　３５０００２） 摘要：以实验室构建的产ＳＯＤ重组菌为出发菌株，研究其摇瓶发酵工艺条件以提高表达水平，进而在５Ｌ高密 度发酵．以确定接种后诱导时间（１６ｈ）、诱导剂浓度（２％）、温度（３０℃）、初始ｐＨ值（６．２）和诱导时间７２ｈ为 －１ 条件，摇瓶水平酶活比初始时提高了６４％；经５Ｌ罐发酵实验，酶活达到４０８６４Ｕ·ｍＬ ，是摇瓶的８６倍． 关键词：ＳＯＤ；毕赤酵母；发酵；温度；ｐＨ 中图分类号：Ｑ８１５　 文献标识码：Ａ ＲｅｓｅａｒｃｈｏｎｔｈｅｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙｏｆｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔＳＯＤｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉｎＰｉｃｈｉａｐａｓｔｏｒｉｓ ＣＨＥＮＧｏｎｇ－ｒｕｉ，ＹＡＮＧＫｕｎ－ｂａｏ，ＺＨＥＮＧＹｉ－ｆｅｎｇ，ＲＡＯＰｉｎｇ－ｆａｎ，ＬＩＵＳｈｕ－ｔａｏ （ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ＦｕｚｈｏｕＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｆｕｚｈｏｕ，Ｆｕｊｉａｎ３５０００２，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｉｎｔｈｉｓａｒｔｉｃｌｅ，ｓｔｕｄｙｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓｏｆｔｈｅｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔｓｔｒａｉｎｓｉｎｓｈａｋｅｃｕｌｔｕｒｅ， ａｉｍｉｎｇａｔｉｍｐｒｏｖｉｎｇｔｈｅｐｒｏｔｅｉｎｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎａｎｄｆｅｒｍｅｎｔｉｎｇｉｎ５Ｌｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎｔａｎｋ．Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｉｎｄｉ ｃａｔｅｓｔｈａｔｔｈｅｓｕｉｔａｂｌｅｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓｆｏｒｔｈｅｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔｃｅｌｌａｒｅａｓｂｅｌｏｗ：ｔｈｅｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｏｆ ｃｅｌｌｇｒｏｗｔｈａｎｄｐｒｏｔｅｉｎｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉｓ３０℃，ｔｈｅｍｅｔｈａｎｏｌｆｅｅｄｉｎｇｉｓ２％（ｖｏｌｕｍｅｒａｔｉｏｏｆｔｈｅｍｅｄｉｕｍ） ｐｅｒｄａｙ，ｔｈｅｉｎｉｔｉａｌｐＨｉｓ６．２，ｔｈｅｉｎｄｕｃｔｉｏｎｔｉｍｅｉｓ７２ｈ．Ａｃｃｏｒｄｉｎｇｔｏｔｈｅｓｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ，ｔｈｅｅｎｚｙｍｅ ａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｓｈａｋｅｃｕｌｔｕｒｅｉｓｉｎｃｒｅａｓｅｄｂｙ６４％ ｃｏｍｐａｒｉｎｇｗｉｔｈｂｅｆｏｒｅｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ．Ｉｎ５Ｌｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ －１ ｃｕｌｔｉｖａｔｅ，ｔｈｅｅｎｚｙｍｅａｃｔｉｖｉｔｙｒｅａｃｈｅｓ４０８６４Ｕ·ｍＬ ，８６ｔｉｍｅｓｏｆｔｈｅｓｈａｋｅｃｕｌｔｕｒｅ． Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ＳＯＤ；ｐｉｃｈｉａｐａｓｔｏｒｉｓ；ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ；ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ；ｐＨ － 超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）作为一种超氧阴离子的捕获剂，能清除生物体内的超氧阴离子自由基（Ｏ ）， ２