食管鳞状细胞癌中P27、cyclinD1、和PCNA的表达和临床病理因素关系研析.pdfVIP

中 文 摘 要 食管鳞状细胞癌中p27,cyclinDl 和PCNA的表达与临床病理因素关系的研究 摘 要 目的:食管癌是世界第三大恶性肿瘤，占中国恶性肿瘤 死亡的第二位，严重影响人类健康，但其癌变机制仍不很清 楚。食管癌的发生有家族聚集性，提示遗传因素在食管癌的 发生中起一定作用。近年来的分子生物学进展己发现了多个 可能与食管癌的发生或演进有关的相关基因或相关的基因 片段，而且，对细胞周期调控的异常在肿瘤发生中的作用有 了更为深刻的认识，已经发现在食管癌中有多种G1/S期 调控元件的表达异常，和食管癌的发生、发展、临床病理特 征有密切关系。其中，抑癌基因p27与和食管癌的淋巴结转 移，病理分级和临床分期关系密切，p27位于染色体12pl3 亦称为多肿瘤抑制因子(MTS1)，它是CDK4/CDK6特异的 抑制剂。它包含两个外显子，编码一个分子量为27KD的蛋 白质。P27的主要作用在于抑制CDK4/CDK6介导的RB基 因蛋白产物的磷酸化，阻止细胞从G1期进入S期。P27与 CDK,cyclin,Rb形成一个反馈调节环路。当p27蛋白基因 缺失、突变、启动子CPG岛异常甲基化使其表达异常时， 同样导致细胞生长失控、细胞转化和癌变。CDK4或CDK6 与CyclinD1结合之后能使细胞周期进入G1期，而p27蛋白 氨基末端具有与CyclinD1竞争CDK4/CDK6的部位，抑制 其激酶活性，并使其激活功能丧失，从而使细胞生长停滞。 cyclinDl基因又称CCND1，位于染色体llgl3上，全长约 1 中文 摘 要 15kb，含5个外显子、它编码295个氨基酸的蛋白。CyclinDl 合成与G1早期，cyclinD1主要与细胞周期依赖性蛋白激酶 4和6(CDK4/CDK6)形成活性复合物发挥作用。在G1期， 给正常的成纤维细胞显微注射抗cyclinDI抗体，能够阻止细 胞进入S期。近年来的临床资料表明，cyclinD1与多种肿瘤 的发生密切相关。细胞增殖核抗原 (proliferationcellnuclear antigenPCNA)是细胞核内的一种酸性蛋白质，分子量为 36000D，是DNA聚合酶的辅助因子，参与DNA合成并在 细胞周期中起着重要作用。PCNA在DNA合成的G1期开 始增加，S期达高峰，G2,M期迅速下降。因此PCNA可 作为评价细胞增殖状态的标志物，用以鉴别癌细胞和正常细 胞。PCNA和食管癌的淋巴结转移及病理分级关系也十分密 切。本实验拟通过对食管鳞状细胞癌组织中p27,cyclinD1与 PCNA的蛋白表达的研究，探讨三者与食管鳞状细胞癌生物 学行为的关系，以期对早期、中期食管鳞状细胞癌的诊断与 治疗提供佐证。 方法:试验所用79例标本系河北医科大学附属第二医 院手术切除的食管癌组织蜡块，均为术后病理证实食管鳞状 细胞癌(年龄42-77岁，平均64.7岁)，该组病例术前均未进行 化疗和放疗。临床病理学分级按)WHO1990年标准，I级28 例，II级24例，III级27例。临床病理分期(TNM)按UICC 标准，0期10例，I期2例，IIA期32例，IIB期17例， III期18例。淋巴结转移状况:有淋巴结转移者36例，无淋 巴结转移者43例。抽取石蜡标本HE 染色玻璃切片，经两 位病理科主任确定食管鳞状细胞癌的病理分级状况与淋巴 结转移情况。(1)按是否有淋巴结转移分为两组:淋巴结转 2 中文 摘 要 移组与淋巴结非转移组，其中，淋巴结转移组36例，淋巴 结非转移组43例。(2)按病理分级分组，共分三组:第一组 I级28例，第二组11级24例，第三组III级27例(3)按临床 分期分四组:0，I期12例，Ila期32例，IIb期17例，III 期 18例。所有标本经采用免疫组织化学方法对标本进行观 察分析。分别检测p27,cyclinDl与PCNA在淋巴结转移组 和无淋巴结转移组中的表达率;检测p27,cyclinDl与PCNA 在不同的病理分级中的表达率;检测p27,cyclinD1与PC