侵染辣椒的黄瓜花叶病毒CP基因的序列分析、原核表达及其抗血清制备.pdfVIP

侵染辣椒的黄瓜花叶病毒CP基因的序列分析、原核表达及其抗血清制备.pdf

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生物技术通报 BIO TE CHN OLOG Y B ULLETIN 20 10 8 CP 1 1 2 1 1 1 刘金亮 王凤婷 侯春喜 魏毅 张世宏 潘洪玉 1 2 ( , 130062; , 130012) : 从吉林长春感病辣椒上获得 一黄瓜 叶病毒( Cucum ber m osaic v irus, CMV) 分离物( CMVCC), 根据 GenBank 中 已登录的 CMV外壳蛋白( coat protein, CP)基因核苷酸序列设计简并引物, 通过 RTPCR的方法克隆到了长度为 657 p的目的 片段序列分析表明, CMVCC与 CMV I组各分离物核苷酸同源性为 93. 2% - 97. 9% 根据完整 CP基因核苷酸序列构建的 系统进化树显示: 38 个CMV 分离物可分为 3 个组, CMVCC属于 CMV 的 IB亚组将 CMVCC CP基因与原核表达载体 pET 22 ( + )连接, 在大肠杆菌 BL21 ( DE3) 诱导表达出分子量约 27 kD的融合蛋白表达的融合蛋白经树脂纯化后免疫家兔制 备了抗血清用间接 ELISA 测定抗血清效价为 1/4 096W estern lotting分析表明制备的抗血清对 CP有高度特异性, 为准 确快速地检测 CMV 奠定了基础 : 黄瓜 叶病毒 辣椒 CP基因 序列分析 原核表达 抗血清制备 Sequence Analysis, Prokaryotic Expression of CP Gene of Cucumber M osaic V irus Infecting Pepper and Antiserum Preparation 1 1 2 1 1 1 Liu Jin liang W ang Fengting H ou Chunx i W eiY i Zhang Shihong PanH ongyu 1 ( Colleg e of P lant Sciences, J ilin University, Chang ch un 130062; 2 StateK ey L aboratory of Sup ramolecular Structure and M aterials, J ilin University, Chang ch un 130012 Abstrac:t One isolate ofCucumber m osaic v irus, CMVCC, w as o tained from infected pepper plants in Changchun, Jilin province. The 657 p coat protein ( CP) gene of CMVCC w as amp lified y RTPCR. The o tained CP gene sequencesw ere com pared w ith se quences of CMV that are availa

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