鸡胚胎干细胞的体外培养和鉴定.pdfVIP

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2016-05-13 发布于安徽
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鸡胚胎干细胞的体外培养和鉴定.pdf

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生物技术通报 ·研究报告· BIOTECHNOLOGY BULLETIN 年第期 2013 7 鸡胚胎干细胞的体外培养和鉴定 1，2 1 1 1 1 1 何文俊刘红叶玲玲李世崇王启伟陈昭烈（1. 军事医学科学院生物工程研究所细胞工程研究室，北京 100071 ；2. 解放军总医院第一附属医院创伤外科研究室，北京 100048）摘要：从鸡X 期胚胎中分离胚盘细胞，以小鼠胚胎成纤维细胞（mouse embryonic fibroblasts ，MEF ）为滋养层，高糖 DMEM 为基础培养基并添加 10 ng/mL bFGF、20 ng/mL hIGF-1、2 ng/mL mSCF、2 ng/mL hIL-11 和1 000 U/mL LIF 等细胞因子对细胞进行培养，获得典型的呈集落生长的鸡胚胎干细胞（chicken embryonic stem cells ，cESCs ）克隆。免疫组化显示，呈集落生长的cESCs 克隆具有较高的内源性AKP 活性并表达多能性标志SSEA-1 和Oct-4 。RT-PCR 分析进一步证实其表达cESCs 特异性基因 cENS-1。结果表明，该培养体系可用于cESCs 的分离并维持其在体外生长并保持未分化状态。关键词：鸡胚胎干细胞胚盘细胞体外培养鉴定 Culture and Characterization of Chicken Embryonic Stem Cells in vitro 1，2 1 1 1 1 1 He Wenjun Liu Hong Ye Lingling Li Shichong Wang Qiwei Chen Zhaolie （1. ，，， 10007 1 ；2. Department of Cell Engineering Institute of Biotechnology Academy of Military Medical Sciences Beijing Wound Healing ，，， 100048 ） and Cell Biology Laboratory the First Affiliated Hospital Chinese PLA General Hospital Beijing Abstract: The blastoderm cells isolated from the stage X embryos of chicken were cultured on feeder layer of mouse embryonic fibroblasts （MEF ）with high glucose DMEM supplemented wi