多元自动化基因组工程.pdfVIP

生物技术通报 ·技术与方法· BIOTECHNOLOGY BULLETIN ( ) 2015, 31 6 :60-66 多元自动化基因组工程 李丹  高海军 （北京理工大学生命学院，北京 100081） 摘 要 ： 基因组编辑技术在基因组工程研究中应用广泛，其中位点特异性核酸酶编辑技术和CRISPR/Cas 系统在单基因编辑 方面贡献卓越，但由于基因组的庞大，这些技术又有一定的局限性。多元自动化基因组工程（MAGE）是一种新型基因组编辑技术， 可同时作用于多个基因，具有快速、高效的特点，已被用于大肠杆菌的基因敲除和基因替换。主要介绍了MAGE 的原理、具体操 作流程及技术进展，并结合MAGE 技术的应用，讨论其发展趋势。 关键词 ： 多元自动化基因组工程；基因组编辑技术 ；基因组工程 ；大肠杆菌 DOI ：10.13560/ki.biotech.bull.1985.2015.06.009 Multiplex Automated Genome Engineering Li Dan Gao Haijun （School of Life Sciences ，Beijing Institute of Technology ，Beijing 100081 ） Abstract: Genome editing is widely used in genome engineering research and site-specific nuclease technologies and CRISPR/Cas system focus on single gene editing. Owing to the huge size of genome, there are some limitations on the applications of these technologies. Multiplex Automated Genome Engineering（MAGE）is a new, fast and efficient genome editing technology, which can operate multiple genes simultaneously, and be used in knockout and replacement of Escherichia coli genes. This review illustrates the recent advances in the theory, operation protocol and technological innovation of MAGE, its application and development trend were also discussed. : multiplex automated genome engineering ；genome editing ；genome engineering ； Key words Escherichia coli 多种生物全基因组测序工作已经完成，相关测 行使或灭活基因，甚至会造成比较严重的副作用， 序结果已在基础科学研究中广泛应用，大量用于基 如触发细胞癌变。更重要的是，这些技术没有可重 因组工程（genome engineering）研究的新技术应运 复性，不能保证同一序列插入不同细胞的同一位 而生。基因组工程是指为了实现某一目标对生物体