琼脂固体培养基培养蜜环菌菌索总DNA的提取.pdfVIP

武汉植物学研究2007，25(4)：371～376 JournalofWuhanBotanicalResearch 琼脂固体培养基培养蜜环菌菌索总DNA的提取 邓艳芹 ，李作洲 ，王传华。，黄宏文 (1．中国科学院武汉植物园，武汉 430074；2．中国科学院研究生院，北京 100039； 3．三峡大学化学与生命科学学院，湖北宜昌 443002) 摘 要：野外采集的蜜环菌[Armillariamellea(Vah1．exFr．)Que1]在提取DNA前需要分离获得纯化的菌丝体。常 规液体培养获得菌丝团的方法感杂率较高，采集固体培养基表面 ceHophane膜上形成的菌丝则难以获得足量的 DNA提取材料。蜜环菌细胞内含有大量多醣类物质，也使得蜜环菌高质量DNA的提取存在一定的困难。本研究 通过改进试验，提供一个直接从琼脂固体培养基培养的蜜环菌菌索中提取高质量 DNA的方法。其中样品的预先 冻融处理方法可以促使蜜环菌菌索与琼脂分离；而在裂解提取缓冲液裂解材料细胞后加入 1．25mol／LKAc溶液， 则有利于除去蜜环菌细胞内的多醣类物质以及残留的少量琼脂