牛流行热病毒LUX~(TM)荧光RT-PCR检测方法的建立.pdfVIP

牛流行热病毒LUX~(TM)荧光RT-PCR检测方法的建立.pdf

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生物技术通报 BIO TE CHN OLOG Y B ULLETIN 20 10 8 LUXTM RTPCR 1, 2 1 1 2 1 1 刘志玲 陈茹 邱索平 马静云 曾碧健 周科 1 2 ( , 510623; , 510642) TM : 采用 LUX 荧光 PCR 技术原理, 以牛流行热病毒( BEFV ) 蛋白抗原 G 基因保守序列为模板设计特异荧光 TM PCR扩增引物, 建立 BEFV LUX 实时荧光 RTPCR 快速检测方法试验结果显示, 所建立的荧光 RTPCR 可特异检测牛流行 热病毒 RNA, 而对蓝舌病病毒牛病毒性腹泻粘膜病病毒水泡性口炎病毒口蹄疫病毒牛白血病病毒以及与 BEFV 同种属 TM 的狂犬病病毒核酸检测呈阴性反应敏感性试验表明 LUX 荧光 RTPCR 对 BEFV RNA 的检测敏感性比常规 RTPCR 方法 TM 提高达 100倍以上该 LUX 荧光 RTPCR 的批内检测变异系数 0. 64% - 1. 1 % ,批间检测变异系数均小于 2% , 表明检测体 TM 系稳定重复性好通过人工添加灭活病毒液的方法制备 30份模拟感染牛血清样品, 采用上述所建立的 BEFV LUX 荧光 RTPCR 方法检测均呈阳性 TM : 牛流行热病毒 LUX 荧光引物 实时荧光 RTPCR TM Establishment of LUX RealtimeAssaies for Rapid Detection ofBovine Ephemeral FeverVir s 1, 2 1 1 2 1 1 L iu Zhiling Chen Ru Q iu Suoping M a Jingyun Zeng Bijian Zhou Ke 1 ( Guangdong EntryExitInsp ection and QuarantineBureau, Guangzhou 510623; 2 College of A nmi alScience; South ChinaAgricultural niversity, Guangzhou 5 10642) A bstrac:t A LUXTM flourescent RTPCR /PCR assayw as estab lished for detecting bovine ephem eral fever virus

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