乙型肝炎病毒反转录酶区rtI233V变异的演变及其病毒学特点分析.pdfVIP

　 军 杂 20 15年3月1 日　第40卷　第3期 188 解放 医学 志　 论　著 乙型肝炎病毒反转录酶区rtI233V 变异的演变及病毒学特点 分析 叶晓玲，刘妍，陈容娟，许智慧，李晓东，叶海燕，唐振祥，程书权，徐东平 [摘要]　目的　分析乙型肝炎病毒(HBV )反转录酶区rtI233V 变异的演变规律及其与阿德福韦酯(A DV )耐药的相关 性。方法　分析9830例慢性HBV 感染者血清样本中HBV rtI233V 变异的检出率。选择其中2例代表性患者，动态收集血 清样本，扩增HBV RT基因并克隆测序(20个克隆/样本) ，观察rtI233V 变异的演变过程。构建pTriEx -HBV (C) 1. 1倍野生 株和3种变异株(rtI233V 、rtN236T 、rtI233V +rtN236T)复制子，瞬时转染Hep G2肝癌细胞，分别加入不同浓度的拉米夫 定(LA M) 、A DV 、恩替卡韦(ETV )和替诺福韦(TDF) 。采用实时荧光定量PCR法检测不同浓度药物作用后细胞培养上清 中HBV DNA 的水平，分析变异病毒复制力与表型耐药的变化特点。结果　9830例慢乙肝患者血清样本中共检出rtI233V 位点变异28例，检出率0.28% ，其中rtI233V 单独变异19例，与rtN236T等经典耐药变异联合出现9例。该变异的检出患 者均有A DV 治疗史，其中16例(57. 1%)接受A DV单药治疗6个月以上，12例(42.9%)接受包括A DV 的多药序贯联合治疗1年 以上。病毒复制力与表型耐药分析显示，rtI233V 变异株的复制力与野生株接近，rtN236T变异株的复制力较野生株显 著降低；rtI233V 变异株对LA M 、A DV 、ETV 和TDF均敏感，rtI233V +rtN236T联合变异对耐药性的影响不大，但rtI233V 变异可明显恢复r tN 2 36T 变异株受损的复制力。结论　r t I2 33V 位点变异与A DV 应答不佳相关，虽不直接降低病毒对 A DV 的敏感程度，但可增加经典A DV 耐药病毒株的复制力，是一种复制力补偿变异。 [关键词]　肝炎病毒，乙型；阿德福韦酯；突变；DNA 复制；抗药性，病毒 [中图分类号]　R5 12.62　　　　[文献标志码]　A　　　　[文章编号]　0577-7402 (20 15)03-0 188-06 [D OI]　10. 11855/j.issn.0577-7402.20 15.03.04 Analysis of evolution and virological characteristics of rtI233V mutations in the hepatitis B virus reverse transcriptase domain YE Xiao-ling 1 2 2 2 2 3 3 , LIU Yan , CHEN Rong-juan , XU Zhi-hui , LI Xiao-dong , YE Hai-yan , TANG Zhen-xiang , CHENG Shu- 3* 2* quan , XU Dong-ping 1School of Graduated, Guilin Medical University, Guilin, Guangxi 541004, China 2 Viral Hepatitis Research Laboratory, Institute of Infectious Diseases/Liver Failure Research Center, 302 Hospital of PLA, Beijing 100039, China 3Department of Liver Disease, Third People’s Hospital of Guilin, Guilin, Guangxi 541002, China * Corresponding author. XU Dong-ping, E-mail: xudongping302@; CHENG Shu-quan, E-mail: csq1