胶质瘤中异柠檬酸脱氢酶基因的检测及对化疗疗效的影响.pdf

．“ 位沦 ．叉 煳 博 学 胶质瘤中异柠檬酸脱氢酶基因的检测及其 对化疗疗效的影响 博士研究生：俞磊 指导教师：漆松涛教授 摘要 第一部分：胶质瘤患者异柠檬酸脱氢酶基因突变的 检测及其临床意义 研究背景和目的 由星形细胞、少突胶质细胞、室管膜细胞等神经胶质细胞起源的胶质瘤是 CNS最常见的恶性肿瘤，其生长部位、病理形态、基因遗传学改变和治疗效果 有很大的差异性，通常依照其病理组织学类型分为低级别胶质瘤(WHOI～II 级)和高级别胶质瘤(WHOIⅡ～Ⅳ级)。胶质瘤呈浸润性生长，与正常脑组织界 限不清，仅靠手术难以治愈，以最大程度上的手术切除为基础，结合放疗和化 疗的综合治疗以延缓肿瘤复发和延长患者的生存期。尽管如此，WHOIII级胶质 瘤者生存期一般才2～3年，而WHO 患者生存期仅为1年左右。胶质瘤患者的病死率居高不下，使其成为中枢神经 系统(Centralnervous system，CNS)最难攻克的肿瘤。令人庆幸的是，分子生 物学的迅速发展给神经肿瘤学研究带来了一场深刻的变革，特别是胶质瘤的基 础研究和临床研究的所有领域。随着人们对肿瘤的分子遗传学和表观遗传学认 识不断提高，以及肿瘤分子流行病学、分子病理学等新兴学科的建立，CNS肿 瘤发生、增殖、侵袭和血管形成的分子机制不断被揭示，同时也为开发各种分 子靶向治疗药物提供了重要的理论基础。 最新的突破发生在2008年，Parsons等学者为了鉴定GBM的基因遗传学改 摘要 变，对GBM的20661个蛋白的编码基因进行测序，在世界上首次发现了异柠檬 酸脱氢酶1的编码基因(isocitrate dehydrogenase1，IDHl)突变存在于胶质瘤中。 突变都是发生在第四外显子的Arg”2(R132)N烈；N序列上，该项成果发表在当 年的SCIENCE杂志上。BalssJ等在685例包含了各种类型不同病理级别的胶质 瘤中更大范围研究了IDHl的R132突变。∞硼突变在胶质瘤中频繁发生，其在 弥漫性星形细胞瘤(WHO 形细胞瘤中的IDHI突变发生率分别为69％和78％，而在毛细胞性星形细胞瘤 I级)中没有检测到IDHl／2突变。2009年新英格兰杂志上发表了美国杜克 (wHo GBM中，也广泛存在于WHOII级、IⅡ级的星形细胞瘤和少突胶质细胞瘤中。 II级)、髓母细胞瘤及 细胞瘤、室管膜下巨细胞瘤(WHOI级)、室管膜瘤(WHO 其他非CNS肿瘤中均没有检测到1DHl突变。随后胶质瘤相关的IDH突变被的 其他中心的一些学者相继研究证实，揭示了IDHl／2突变与患者的年龄，病理类 型以及临床预后的关系，并且发现IDH突变与其他胶质瘤分子标记物比如TP53 factor 突变，表皮生长因子受体基因(Epithelialgrowthreceptorgene，EGFR)扩 增，BRAF DNA (0(6)-methylguanine 相关性。 但是在本实验完成之前尚未有针对中国人群中胶质瘤患者的1DH突变的相 关报道。那么，在中国人群胶质瘤患者中是否同样存在IDH突变?其发生率与 欧美国家的研究结果是否有差异?IDH突变与胶质瘤患者同步放化疗 (Concomitant 合酶链反应一高分辨率熔解分析方法和直接测序的方法检测中国人群胶质瘤患 博士学位论文 者IDH突变情况，并与国外文献报道的结果进行比较。另外本研究也初步探讨 了IDH突变与胶质瘤患者CCRT效果的关系。 方法 研究对象 收集南方医科大学南方医院神经外科203例中国人群胶质瘤患者的肿瘤标 本(包括各个WHO级别和不同的病理类型)，所有的肿瘤标本都取自本院病理 科