酶的基本性质实验.docVIP

实验报告 课程名称：生物化学实验（甲） 指导老师： 成绩：__________________ 同组学生姓名： 一、实验目的和要求（必填） 二、实验内容和原理（必填） 三、实验材料与试剂（必填） 四、实验器材与仪器（必填） 五、操作方法和实验步骤（必填） 六、实验数据记录和处理 七、实验结果与分析（必填） 八、讨论、心得 酶的基本性质实验 A、底物专一性 实验目的和要求： 1. 了解酶的专一性； 2. 掌握验证酶的专一性的基本原理及方法； 3. 学会排除干扰因素，设计酶学实验。 实验内容和原理： 酶催化作用的一个重要特点是具有高度的底物专一性，即一种酶只能对某一种底物或一类底物起催化作用，对其他底物无催化反应。 ↗相对专一性 酶的专一性 →绝对专一性 ↘立体异构专一性 本实验以唾液淀粉酶、蔗糖酶对淀粉、蔗糖水解反应的催化作用来观察酶的专一性。采用Benedict试剂检测反应产物。 Benedict试剂是碱性硫酸铜溶液，具有一定的氧化能力，能与还原性糖 的半缩醛羟基发生氧化还原反应，生成砖红色氧化亚铜沉淀。 Na2CO3+ 2H2O → 2NaOH + H2CO3 CuSO4+ 2NaOH → Cu(OH)2+ Na2SO4 还原糖(—CHO or —C=O)+ 2Cu(OH)2 → Cu2O↓ + 2H2O + 糖的氧化产物 ↓ ↓ ↓ 醛基 酮基 砖红色或红色 在分子结构上，淀粉几乎没有，而蔗糖全无半缩醛基，它们均无还原性，因此它们与Benedict试剂无呈色反应。 淀粉被淀粉酶水解，产物为葡萄糖；蔗糖被蔗糖酶水解，其产物为果糖和葡萄糖，它们都为具有自由半缩醛羟基的还原糖，与Benedict试剂共热，即产生红棕色Cu2O沉淀。 本实验以此颜色反应观察淀粉酶、蔗糖酶对淀粉和蔗糖的水解作用。 实验材料与试剂： 1、实验材料 ⑴ 蔗糖酶液(样品Ⅳ1：10稀释）; ⑵ 新鲜唾液（含唾液淀粉酶）。 2、实验试剂 ⑴ 蔗糖酶液(样品Ⅳ1：10稀释）； ⑵ 唾液淀粉酶液（唾液1：200稀释） ⑶ 5%蔗糖（A.R.）溶液； ⑷ 0.5%淀粉溶液（含0.3%NaCl）； ⑸ Benedict试剂。 实验器材与仪器： 1.漏斗； 2.脱脂棉花； 3.恒温水浴（37℃，100℃）； 4.量筒； 5.试管及试管架； 6.烧杯； 7.吸量管。 操作方法和实验步骤： ㈠ 检查试剂 淀粉专一性 蔗糖酶的专一性 实验结果与分析： 检查试剂： 试剂处理 试管编号 1 2 3 0.5%淀粉（0.3%NaCl）溶液（ml） 3 5%蔗糖溶液 （ml） 3 蒸馏水 （ml） 3 Benedict试剂 （ml） 2 2 2 摇匀，沸水浴2~3分钟 记录观察结果 淀粉酶专一性： 试剂处理 试管编号 1 2 3 0.5%淀粉溶液 （ml） 3 5%蔗糖溶液 （ml） 3 蒸馏水 （ml） 3 唾液淀粉酶溶