第4章核酸化学要点.pptVIP

第四章核酸化学 核酸（nucleic acid） 核酸是由核苷酸通过3、5-磷酸二酯键连接而成的生物大分子，是生物化学与分子生物学研究的重要对象和领域。 核酸是现代生物化学、分子生物学的重要研究领域，是基因工程操作的核心分子。 1868年瑞士青年科学家F.Miescher由脓细胞分离得到细胞核，并从中提取出一种含磷量很高的酸性化合物，称为核素（ nuclein ）。 胸腺的细胞核特别大，酵母的细胞质很丰富，这是两种提取核酸的极好来源。 1.2.核酸的早期研究 Miescher的发现曾给生物学带来巨大希望。 Hoppe-Seyler认为，核素“可能在细胞发育中发挥着极为重要的作用”。 1885年细胞学家O.Hertwig提出核素可能负责受精和传递遗传性状。 1895年遗传学家E.B.Wilson推测，染色质与核素是同一种物质。 随后核酸的化学研究却偏离了最初的正确方向。 （列文）Levene的“四核苷酸假说” 严重阻碍核酸研究达30年之久。 碱基成分的精确测定推翻了“四核苷酸假说”，并证明了核酸的高度特异性。 1.3 DNA是主要的遗传物质 细胞学的证据： A.DNA分布在细胞核中，是染色体的主要成分，而染色体已知是基因的载体。 B.细胞内DNA含量十分稳定，而且与染色体数目平行。 C.一些可以作用于DNA的物理化学因素均可引起遗传性状的改变。 直接证据： 1944年O.Avery等首次证明DNA是细菌遗传性状的转化因子。 1952年，A.D.Hershey和 M.Chase用35S和 32P标记的噬菌体T2感染大肠杆菌，结果发现只有35S标记的DNA进入大肠杆菌细胞内，而32P标记的蛋白质仍留在细胞外。 1.4 RNA参与蛋白质的生物合成 1958年Crick提出“转换器”假说。1959年分离出核糖体RNA。1961年F.Jacob和J.Monod提出信使RNA功能的假设。 1992年H.F.Noller等证明28S rRNA 具有酶活性，催化肽键成。过去以为蛋白质肽键的合成是由核糖体的蛋白质所催化，称为转肽酶。 rRNA约占细胞总RNA的80%，是装配者；tRNA约占细胞总RNA的15%，是转换器；mRNA约占细胞总RNA的3%—5%，是信使。 1.5 DNA双螺旋结构模型的建立 二十世纪上半叶，数理科学进一步渗入生物学。 数理学科的渗入不仅带来了新的理论和思想方法，而且引入了许多新的技术和实验方法。 核酸生物学研究分成了三个学派： 结构学派、信息学派、生化遗传学派。 结构学派以英国物理学家W.T.Astbury、J.D.Bernal和他们的学生为代表，他们的兴趣在于利用X射线结晶学技术研究生物大分子的三维结构，并认为这是解决生物学问题的根本途径。 信息学派以物理学家M.Delbruck与微生物学家S.Luria领导的“噬菌体小组”为代表。 1952年噬菌体小组的两个成员A.Hershey和M.Chase用32P标志噬菌体的DNA，35S标志蛋白质，然后感染大肠杆菌。结果只有32P-DNA进入细菌细胞内，35S-蛋白质仍留在细胞外，有力的证明了DNA是噬菌体的遗传物质。 1944年，Avery的细菌转化实验证明DNA是遗传物质。 1951年22岁的年轻博士Watson在剑桥遇到正在M.Perutz小组做研究生的Crick，两人便合作探求DNA的分子结构。1953年提出了DNA双螺旋结构模型。 Watson和Crick提出DNA双螺旋结构模型的主要依据是： ※已知核酸的化学结构知识； ※ E.Chargaff发现的DNA碱基组成规律； ※ M.Wilkins和R.Franklin得到DNA的X射线衍射 结果。 1958年Crick总结了当时分子生物学的成果，提出了“中心法则”,DNA → RNA →Protein 生化遗传学派 用生物化学法从事遗传学研究，提出“一个基因一个酶”假说，“一个基因一条多肽链” 假说。 1961年F.Jacob和J.Monod提出操纵子学说，并假设了mRNA功能。 1970年H.M.Temin等和D.Baltimore等从致瘤病毒中发现了逆转录酶。 1.6 生物技术的兴起 20世纪70年代前期诞生了DNA重组技术。 将DNA重组技术用于改变生物机体的性状特征、改造基因、以至改造物种，统称为基因工程。 反义RNA的发现，表明RNA具有调节功能；又发现一个基因转录产物通过选择性拼接可以形成多种同源异形体（isoform），使“一个基因一条多肽链”的传统观念也受到冲击。发现mRNA的序列可以发生改变，称为编辑（editing）。 1986年 H.Dulbecco 在《Science》上提出“人类基因组计划”(简称HGP)；1990年美国 出资30亿美元，用15年