人参总皂苷TSPG联合EPO对白血病细胞KG1-α增殖影响.pdfVIP

第３６卷第２１期 第　三　军　医　大　学　学　报 Ｖｏｌ．３６，Ｎｏ．２１ ２０１４年１１月１５日　　　　　　　　　　 Ｊ　Ｔｈｉｒｄ　Ｍｉｌ　Ｍｅｄ　Ｕｎｉｖ 　　　　　　　　　　 Ｎｏｖ．１５　２０１４ ２１６７ 文章编号：１０００５４０４（２０１４）２１２１６７０６ 论著 人参总皂苷ＴＳＰＧ联合ＥＰＯ对白血病细胞ＫＧ１增殖的影响 α 李丹阳，夏　菁，冯子强，石庆强，游智梅，刘泽洪，陈地龙，李　静　　（４０００１６重庆，重庆医科大学基础医学院组织学 与胚胎学教研室，干细胞与组织工程研究室） 　　［摘要］　目的　探讨人参总皂苷ＴＳＰＧ单独或联合人促红细胞生成素（ＥＰＯ）对人白血病细胞ＫＧ１增殖的影响及 α 机制探讨。方法　 体外培养ＫＧ１细胞，选取处于对数生长期的细胞用于实验。空白对照组予以常规培养；人参总皂苷 α ＴＳＰＧ组分别加入２５、５０、１００、２００、４００ｍｇ／ＬＴＳＰＧ；人参总皂苷＋ＥＰＯ组加入上述等量ＴＳＰＧ，同时加入０．５Ｕ／ＬＥＰＯ，并设 置ＥＰＯ对照组。培养３、７、１４ｄ后用ＣＣＫ８法检测ＴＳＰＧ单独或联合ＥＰＯ对ＫＧ１细胞增殖的影响；运用ＲｅａｌｔｉｍｅＰＣＲ α 技术检测ＥＰＯＲ、ＳＴＡＴ５、Ｊａｋ２、ＡＫＴ等ＥＰＯ／ＥＰＯＲ通路相关基因的表达。用Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测Ｂｃｌ２、Ｂａｘ、ＣｌｅａｖｅｄＣａｓｐａｓｅ３、 Ｐ５３、Ｐ１６等蛋白的表达，ＥＰＯＲ蛋白的表达及其活性。结果　 人参总皂苷ＴＳＰＧ在体外能明显抑制 ＫＧ１细胞的增殖， α １００ ｍｏｌ／Ｌ为最适作用浓度，７ｄ为最适作用时间，如果在ＥＰＯ存在的条件下，其最适浓度则降低到７５ｍｇ／Ｌ；与对照组相 μ 比，在ＥＰＯ存在的条件下人参总皂苷ＴＳＰＧ诱导可明显使细胞阻滞于Ｇ／Ｇ期，若不使用ＥＰＯ则ＴＳＰＧ对细胞周期无影 ０ １ 响；ＲｅａｌｔｉｍｅＰＣＲ检测结果显示ＴＳＰＧ诱导组ＫＧ１细胞内ＥＰＯＲ、Ｊａｋ２、ＳＴＡＴ５等由ＥＰＯＲ介导的ＪＡＫＳＴＡＴ通路相关基 α 因的表达均随ＴＳＰＧ浓度增加而降低，其中高浓度具有明显差异（Ｐ＜０．０５）；Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测经单独使用ＴＳＰＧ处理了７ｄ 的ＫＧ１细胞，与对照组相比，其 ＥＰＯＲ及 ｐＥＰＯＲ表达明显下调，Ｊａｋ２、ＳＴＡＴ５、ｐＳＴＡＴ５、Ｂｃｌ２蛋白表达下调，而 Ｂａｘ、 α ＣｌｅａｖｅｄＣａｓｐａｓｅ３表达增高，Ｐ５３及Ｐ１６无变化；然而添加了ＥＰＯ处理的各组ｐＥＰＯＲ、Ｊａｋ２、ｐＳＴＡＴ５、Ｐ５３及Ｐ１６的表达明 显增加，Ｂｃｌ２、Ｂａｘ、ＣｌｅａｖｅｄＣａｓｐａｓｅ３的表达没有变化。结论　 ＴＳＰＧ能下调细胞内由ＥＰＯＲ介导的ＪａｋＳＴＡＴ通路相关蛋 白的表达，并降低ＥＰＯＲ的活性，进而下调Ｂｃｌ２、上调Ｂａｘ和ＣｌｅａｖｅｄＣａｓｐａｓｅ３来促进细胞凋亡；而添加了ＥＰＯ后这种作 用被拮抗，抑制细胞增殖的作用是通过上调Ｐ５３及Ｐ１６促进细胞衰老而产生的。 　　［关键词］　 人参总皂苷；ＫＧ１细胞；促红细胞生成素；细胞凋亡；细胞衰老 α 　　［中图法分类号］　Ｒ２８５．５；Ｒ７３３６１；Ｒ７３３．７　　 ［文献标志码］　Ａ Ｅｆｆｅｃｔｏｆｔｏｔａｌｓａｐｏｎｉｎｓｏｆ