河北省传染性法氏囊病病毒地方株的分离与鉴定.pdfVIP

Y 933娄17 分类号：窭塾．3l 单位代码：1QQ竖 蟹缓： 垒珏 学号 照Q2Q9Q§筵鳗 河北省传染性法氏囊病病毒地方株的 分离与鉴定 BursalDisease lsolationandIdeⅡ翻瞪lcationofInfectious iH HebeiProvince 学位审请人：尹卫卫 指导教师：孙继国教授 学科专监：预虢善医学 学位类别：农学硕士 授予单位：；霹j≥农业大学 答辩日期：二oo六年六月十六丑 摘要 传染性法氏囊病病毒是引起鸡免疫抑制以及对其他病原体感染升高的急性传 染病，造成河北省鸡生产地区的严重损失。尽管使用疫苗但仍时有暴发，传统的灭 活苗和弱毒苗不能抵制变异株的攻击。抗原变异使河北省传染性法氏囊病变得更加 复杂。 本研究对河北省两株传染性法氏囊病病毒进行培养鉴定，通过在sPF鸡胚上传 代，继而在鸡胚成纤维细胞上传代，适应细胞生长，使这两毒株产生轻微的病变， 电镜观察，病毒粒子约60nm。理化特性研究表明，该分离毒株对氯仿、乙醚有抵抗 力；耐p}12．0处理；耐热性试验中，56℃30min使该病毒感染力稍下降。 进行易感鸡的感染试验，鸡没有特征性的肉眼可见的病理变化，制作病理切片， 进行观察发现这两株病毒可引起免疫器官的损伤表现为法氏囊的萎缩、脾脏肿大。 感染后期出现淋巴细胞坏死，淋巴滤泡间隙有嗜中性粒细胞浸润，通过对两株河北 分离病毒的毒力测定致病性进一步验证了两毒株属于弱毒株。 反转录一聚合酶链式反应(RT—PcR)被认为是最快速的检测IBDV的方法，对这 两株病毒进行反转录一聚合酶链式反应(RT—PCR)，成功的扩增出唯一的494bp的目 的条带，对其进行基因组的分析。 的亲缘关系较近，同源性达94．5％一97．9％；其次是Cul同源性达90．3％一95．2％而与其 它毒株关系较远；与美国标准株STc和002—73的关系较远。 关键词：传染性法氏囊病毒；萎缩；分离：鉴定；反转录一聚合酶链式反应 lsolan蛆釉dId绷t溺ca60珏硝l划＆耋jo珏sB珏琳aIDis∞se主ll珏ebeiP阳v如ce Au岫EⅥnwdwei S辫iality：pfeventive№e矗na叫M。dicine supe州sor：SunJ{gllo A瓤tract lnfKtiousbursaldisease thecausativeofa Viru8(1BDV)isagcnthi曲1yconta颤ous in was d主seaseehick髓，Theoutc啦neofi栅t玳izationpoodyid曲虹曩ed．1BDisoneof djseasesthat豫strain oftlle in majorconta季ous healmydevel叩m锄tpoulnyindustry Hebei whichjsa conc％trat。d areas．I