第二章荧光光谱与荧光信号采集处理摘要.ppt

第二章 荧光光谱与荧光信号采集处理 光致发光： 利用光源激发而产生，荧光和磷光均为光致发光. 激发光(EXCITATION)： 能特异性地激发某种荧光的一定波长范围内的光线称为该荧光的激发光。 激发/吸收光谱；吸收波峰(最大吸收波长) 发射光谱： 又称荧光发射光谱，反映荧光物质的荧光发射强度与发射光波长之间相互关系的光谱曲线。 实质： 反映了所发射的荧光中各种波长组分的相对强度。 二者关系: 物质发生电子从基态向激发态跃迁过程中吸收的能量，要高于荧光发射的能量，因此，荧光的波长要大于激发光的波长，两者的差值称为 Stokes shift（斯托克斯位移）。 2.荧光的淬灭 由于各种原因，使荧光探针的荧光强度降低的现象称为荧光淬灭。 能引起荧光强度降低的物质称为淬灭剂。 3.荧光探针： 能产生荧光的特异性生物染料（PI, Dapi)、标有荧光素的特异性蛋白结合物（荧光抗体）。 荧光探针的发展非常迅速，目前仅美国 Molecular Probes公司就可提供1800多种荧光探 针，每年该公司还不断推出新的荧光探针。通 常每种被测物质都有几种或几十种特异的荧光 探针。