第六糖蜜发酵生产柠檬酸.ppt

第六章 糖蜜发酵生产柠檬酸 第一节 概 述 柠檬酸又叫枸橼酸，学名2-羟基丙烷-1，2，3-三羧酸。 1、物理形状 柠檬酸为无水或含一分子水的无色晶体或粉未，有强烈的酸味，易溶于水和酒精。一水物密度为1.542，将一水物缓慢加热至70～75℃时，晶体软化并开始熔化，继续加热至130℃时则失去结晶水，成为无水物，最后在132～152℃内完全熔化。无水物密度1.6650，熔点是153℃。 2、生产概况及历史 柠檬酸广泛存在于植物中，如在柠檬、菠萝、柑橘、葡萄汁、棉叶中等。最初，柠檬酸是在果汁中加入石灰，使生成柠檬酸钙沉淀后再提取。 1917年美国发现黑曲霉进行浅盘发酵可产生柠檬酸，并于1952年美国首先采用深层发酵法进行柠檬酸的工业生产。 我国采用发酵法生产柠檬酸是从1958年开始的。使用的原料有甘薯干等淀粉质原料，也有用甜菜糖蜜或甘蔗糖蜜等糖质原料的。 世界上对柠檬酸的需求量持续增大，年增长率为3.5％～4.5％。在国外市场需求的刺激下，我国柠檬酸工业在80年代得到迅速发展，1988年全国产量达到5.7万吨居世界第二位，目前在国内新建或扩建的柠檬酸厂达数十家，1997年全国柠檬酸产量超过17万吨。 3、用途 在食品、医药、日用化学、电镀、皮革、冶金等多种行业中用途非常广泛。 第二节 柠檬酸发酵机理 一、柠檬酸的产生菌 以糖质为原料发酵生产柠檬酸所用的菌种主要是：黑曲霉 国内适合于糖蜜发酵柠檬酸的黑曲霉菌种有川柠Ⅲ-1、川柠19-1等。 二、柠檬酸发酵机理 由葡萄糖发酵生成柠檬酸与三羧酸循环（TCA循环）有密切的关系（见80页图1-6-1）。 三羧酸循环是微生物生长所需要的一种代谢途径。柠檬酸只是代谢途径中的一个中间产物，按理，它是不会被大量积累下来的。那么，以黑曲霉菌发酵生产的柠檬酸为什么能够大量积累呢？普遍认为这是与黑曲霉进入产酸期时，三羧酸循环酶系中的顺乌头酸酶或异柠檬酸脱氢酶等可被某些金属离子缺乏或代谢毒物的存在等因素影响，而受到抑制，即酶的活性被减弱，引起三羧酸循环障碍有着很大的关系。 为了积累柠檬酸，必须要解决两个基本问题：第一是要设法阻止柠檬酸的进一步反应，第二是在阻断（或大大减弱）柠檬酸进一步反应时，还应当注意满足菌体生长的需要，即既要使某一种酶的活性大大降低而又要使之不至于完全失去活力，保持着不断补充被阻断反应以后的中间产物机制，这样才有可能使我们所需要的中间产物柠檬酸得以大量积累。 生产上阻止柠檬酸进一步反应的方法有： （1）加入适量亚铁氰化钾 （2）通过诱变 由葡萄糖发酵生成柠檬酸的总反应式可如下表示： 2C6H12O6十3O2一2C6H6O7十4H2O 由总反应式可算出，柠檬酸的理论产率为106.7％。但实际上，由于菌体生长要消耗糖，且在发酵过程中会有部分糖消耗于生成其他有机酸，以及生产过程各种控制因素不尽理想，使工厂生产实绩往往低于此值。 第三节 种子的培养  一、菌种的选育 优良菌株的特点： 生长速度快、个体形状和生化指标稳定、对糖转化率高、副产物如草酸及葡萄糖酸少、菌体易于分离等。 选育优良的菌株是柠檬酸发酵的关键。诱变是获得优良菌株的必要手段。 二、种子的培养 发酵时用的种子即可以是孢子（试管或茄子瓶培养的孢子），也可以是预先培养的菌丝体。当以孢子作接种物时，要先用无菌水或含吐温80的无菌水配制成孢子悬浮液再接种于发酵培养基内。 孢子悬浮液可直接接于浅盘发酵或接于种子罐，控制一定条件，把孢子培养成一定数量和质量的菌丝，供深层发酵罐作种子用。 第四节 柠檬酸发酵 一、发酵的方法 以糖蜜发酵生产柠檬酸的方法共有三种： 表面发酵（又称浅盘发酵） 深层发酵（适宜大规模生产厂采用 ） 固体发酵。 二、发酵工艺条件 1．糖液浓度和糖蜜原料的预处理 用黑曲霉生产柠檬的产量与培养基液中的初糖浓度有直接关系。