血红蛋白的分离纯化与理化性质研究_new_new重点解读.docxVIP

生物科学大实验 第  PAGE \* MERGEFORMAT 23 页 共  NUMPAGES \* MERGEFORMAT 26 页 华中科技大学生命科学与技术学院 生科大实验报告 题目：血红蛋白的分离纯化与理化性质研究 专业班级：某某班 姓名：某某某 指导教师：某某某 实验时间：2015年9月28日至 2015年10月20 日 提交报告时间： 2015年11月22日 摘要 血红蛋白(Hemoglobin , Hb)是动物血液中的一种由4个亚基组成的多亚基蛋白质。作为体内氧运输的载体具有重要的生理功能。在 Hb 与氧结合及释放过程中 ,体现了别构蛋白各亚基之间相互作用的正协同效应特征 ,具有很强的代表性 ,是研究别构蛋白特性的良好材料。此外 ,Hb 的单亚基结构还与食用肉主要色素蛋白-肌红蛋白(Myoglobin , Mb)的结构非常相似 ,均为血红素蛋白质,具有一个血红素活性中心。只是 Mb 是单亚基结构 ,而 Hb为4亚基结构,相当于Mb的4倍体。Hb和Mb均具有3种天然诱导体构型 ,即氧合型 (Oxy-Hb ; Oxy-Mb) ,还原型(Red-Hb ; Red-Mb)和氧化型(Met-Hb; Met-Mb) 。两种蛋白质的相同构型均具有相同的颜色及相似的光谱学特性。 Abstract Hemoglobin（Hb）is one of poly-subunit proteins composed of four units in the animal blood. It has the important physiological function that is the oxygen transport carrier. ?In the process of Hb combining with oxygen and releasing, it embodies positive cooperative effect of the interactions between the various subunits in the allosteric protein. It has a strong representative and is a good material for studying the characteristics of allosteric proteins. Besides,its monomer’s structure is similar to a major meat chromoprotein—Myoglobin(Mb).They are all heme protein that have a heme active center. Mb has only one subunit, but Hb has four subunits. Hb is about four times that of Mb. Hb and Mb have three kinds of natural induced body configuration, type the oxygenation (foxy - Hb; foxy - Mb), reduced (Red - Hb; Red - Mb) and oxidation type (Met - Hb; Met - Mb).?The same configuration of two proteins has the same color and similar spectroscopy characteristics. 目录 摘要2 目录3 选题背景1.1血红蛋白简介51.2血红蛋白的生理意义及分离提纯的作用5 方案论证 2.1实验材料及试剂6 2.2分析方法6? 2.2.1蛋白质浓度的测定6? 2.2.2血红蛋白的测定7? 2.2.3聚丙烯酰胺凝胶电泳8 2.3血红蛋白的提取分离9? 2.3.1动物血液的收集与处理9? 2.3.2红细胞的破碎和血红蛋白原液的制备9? 2.3.3盐析沉淀9? 2.3.4Sephadex G-75色谱纯化10 2.4血红蛋白的纯度鉴定10? 2.4.1制胶10? 2.4.2架好胶板，检漏11? 2.4.3灌胶并水封11? 2.4.4制孔11 2.4.5加样11? 2.4.6电泳