组胚复习题重点解读.docx

绪论 家畜组织学与胚胎学的研究内容 1. 家畜组织学（domestic animals histology） 是研究机体微细结构及其相关功能的科学。其研究水平包括组织、细胞、亚细胞和分子。 组织（tissue）：是由形态相似和功能相关的细胞群及细胞间质构成。 构成：细胞群和细胞外基质。 细胞：是机体结构和功能的基本单位。成人约有1015 个、200 余种。 细胞间质：由细胞分泌形成。 类型：上皮组织、结缔组织、肌组织和神经组织。组织以不同的种类、 数量和方式组合形成器官（organ)；若干功能相关的器官构成系统(system)。 2. 家畜胚胎学（domestic animals embryology) 是研究家畜个体发生及发育规律的科学。包括3阶段的发育： 胚前发育：指两性生殖细胞的发生和结构。 胚胎发育：从受精到胎儿分娩出的过程。 胚后发育：指动物出生后至性成熟阶段。 研究家畜组织学与胚胎学的技术和原理 1. 光镜法： 石蜡切片（paraffin sectioning）：包括取材、固定、脱水、包埋、切片（5 ～ 10 μm）、染色等。 苏木精- 伊红染色法（hematoxylin-eosin staining， HE染色法）：苏木精为碱性染料，使染色质和核糖体着紫蓝色；伊红为酸性染料，使胞质和细胞外基质着红色。 特殊染色：如银染、PAS反应等。 2. 电镜法： 透射电镜术（transmission electron microscopy, TEM）：用于观察组织细胞的超微结构 戊二醛、锇酸双重固定→树脂包埋→超薄切片（50~80nm）→电子染色（醋酸铀、柠檬酸铅） 根据电子束在不同结构上被散射程度的差异表现为电子密度高（黑或深灰色）和电子密度低（浅灰色） 扫描电镜术（scanning electron microscopy, SEM）：用于观察组织细胞表面结构，具有真实的立体感，无需制备切片。 3. 组织化学 组织化学术（histochemistry）：是应用化学、物理、生物化学、免疫学或分子生物学的原理和技术，与组织学技术结合而产生，在组织切片显示某种物质的存在和分布状态。 分类：一般组织化学术、免疫组织化学术、原位杂交术 一般组织化学术：组织中的某种结构成分与所加试剂发生化学反应、并呈现某种颜色，在显微镜下可观察到。如：糖类，PAS（过碘酸希夫）反应，显示多糖和糖蛋白，呈紫红色。脂类，锇酸固定染色，呈???色。 免疫组织化学术：根据抗原、抗体特异性结合原理，检测组织切片中的肽和蛋白质。 原位杂交术：用带标记物的已知碱基顺序的核酸探针与细胞内待测核酸按碱基配对原则进行特异性原位结合（杂交），并通过对标记物的显示而获知待测核酸的有无及相对量。检测基因（DNA片段）的有无、基因的表达活性（mRNA）。常用标记物有放射性核素、地高辛。 4. 放射自显影法 通过活细胞对某种放射性物质的特异性摄入，以显示该物质在组织和细胞内的分布、含量和代谢过程，借以反映细胞的功能状态。如：用3H标记的胸腺嘧啶核苷研究DNA合成和细胞增殖状态；用125I 观察甲状腺滤泡内碘化部位。 5. 图像分析 又称形态计量术：应用数学和统计学原理对组织切片提供的平面图像进行分析，从而获得立体的组织细胞内有形成分的数量、体积、表面积等参数，从量的角度显示结构与功能的关系 体视学（stereology）：根据连续的组织切片应用计算机进行三维重建，以获得微细结构的立体模型。 6. 细胞培养与组织工程 细胞培养（cell culture）：把从机体取得的细胞在体外模拟体内的条件下进行培养；培养组织块或器官则称组织培养术或器官培养术。用于研究细胞、组织的代谢、增殖、分化、形态和功能变化，各种理化因子对活细胞的影响。 培养条件：营养、生长因子、pH值、渗透压、O2和CO2浓度、温度，控制污染。用相差显微镜观察。 组织工程（tissue engineering）：用细胞培养术在体外模拟构建机体组织或器官的技术。目前，正在构建的有皮肤、软骨、骨、肌腱、骨骼肌、血管、角膜等；其中以组织工程皮肤较为成功，已成为商品用于治疗烧伤、皮肤静脉性溃疡等疾病。 研究内容：① 种子细胞，即增殖旺盛的细胞，多为干细胞；② 细胞外基质，可用生物材料（如牛胶原、胎盘）和人工合成高分子材料；③ 构建组织或器官，即把细胞置于细胞外基质中进行三维培养、并形成所需要的形状；④ 将构建物移植机体的方法。 三、研究家畜组织学与胚胎学的意义 1. 促进了生理学的进步。 2. 是病理学的基础。 3. 促进人类对家畜机体的深入了解。 四、家畜组织学与胚胎学的学习方法 1. 要从组织水平和细胞水平审视观察 组织水平：层次顺序、特征性结构和细胞。 细胞水平：主要细胞的分布、结构特点及功能。 2. 形态和结构相统一 结