研究生-组织化学概论2重点分析.ppt

病理学技术-组织化学 病理学教研室 王 弦 组织切片法 不同的切片制备方法，其切片方法也有较大的差别，组织切片法包括石蜡切片法、冰冻切片法、火棉胶切片法、石蜡包埋半薄切片法、树脂包埋薄切片法和大组织石蜡切片法等。 常用的切片工具包括组织切片机、切片刀和自动磨刀仪器等。 石蜡切片法 石蜡切片机——Lecia RM2235旋转式切片机 轮转切片机具体使用及技巧1. 切片机结构简介： 2. 安全性能操作切片机对操作者而言具有潜在的危险性，在更换刀具和样品的时候，手很容易被割伤，因此在整个操作过程中，安全性是非常有必要 再三强调的。 手轮锁 一般切片机都会有手轮安全锁（3），可以将手轮锁定在任意位置。防止手轮意外被触及而带动样品头升降。 而有第二手轮锁（5）的切片机不仅更能确保安全性，还提高了使用的便利性。第二手轮锁职能将手轮把手锁定于最高点，即样品头锁定 于距离刀/刀片最远的位置，留出足够空间更换刀具和样品。操作者在切片过程中，单手就可以将手轮锁定/解锁。 刀架保护装置 无论是钢刀刀架还是一次性刀片架，刀架上必须配备结合牢固的护刀器（7）（9），在更换样品或者暂时不进行切片的时候，护刀器必 须盖在刀架上。好的护刀器必须跟随刀架一同侧向移动，有效覆盖刀锋的全长。  3. 切片机功能简介： 回缩功能回缩功能开启，切片行程中当样本头上升到最高点时，样品头向刀架反方向回退200μm，防止刀刃和样品的互相接触或摩擦。 样品头定位装置：带有0位指示器（32）的样品头定位装置能以最便捷的方式矫正蜡块/样品的平面，直到和刀刃平行。锁杆（29）用来紧固/放松样 品头定位器，旋转旋纽（30）可以使定位器作南北向旋转，旋转旋纽（31）可以是定位器作东西向旋转。每个方向最多旋转8°，旋 纽上标有刻度，每旋转一圈可控制样品头旋转2°。 刀架（一次性刀片架）（9）护刀器，切片时翻下，更换样品或结束切片时，一定要翻上，覆盖住刀刃。（10）压板控制锁杆，紧固/放松刀片（11）刀架侧向移动控制锁杆 刀架需要定期拆开进行清洁以确保切片良好工作状态。以下是清洁步骤：1.翻下护刀器(9)。2.向前旋转侧向移动锁杆（11），并向外拉出锁杆。3.连同压板（83）一起，推动刀架底盘（86），直到底盘和压板一起从刀架弧形基座（87）上取下。4.向下旋转压板控制锁杆（10），并将锁杆向外拉出。5.取下压板（83）。6.擦拭刀架的所有部件。（请不要使用二甲苯或含有酒精的清洗液，比如玻璃清洁液。）7.擦干所有部件并重新安装回原样。8.清洁所有活动部件后，在部件上涂上薄层的机油。9.在安装压板（83）时，必须保证压板上缘和刀架底座的后缘平行且在同一水平。 调节刀架的间隙角(1)刀架的刻度0、5、10是用来提示刀的间隙角。位于刀架的右侧。(2)在刀架底座上也有相应的刻度，在调节间隙角时候可以参考。(3)用专用六角扳手拧松螺丝，刀架就可以移动。(4)移动刀架，直到刀架底座上刻度线对准刀架上指定的读数。放大图示中显示的间隙角读数为5。(5)保持刀架的位置，然后重新用扳手紧固螺丝。 样品夹常见样品夹一般分夹蜡块的标准样品夹和夹包埋盒的通用样品夹。 标准样品夹 特殊样品夹 组织经石蜡包埋制成的蜡块，用切片机制成切片的过程称为石蜡切片法。 现在病理诊断最常用的制作切片的方法。 在切片前应先切去标本周围过多的石蜡（修块），但也不能留的太少，否则易造成组织破坏，连续切片时分片困难。 一般切4－6um的切片，特殊情况可切1－2um。 要观察病变的连续性可制作连续切片。除此之外，石蜡包埋的组织便于长期保存，因此石蜡切片仍是目前各种切片制作方法中最常用、最普遍的一种方法。 一、切片前的准备 1. 固定后的标本经脱水透明浸蜡和包埋以后，制成蜡块。 2. 石蜡切片是以石蜡作为组织的支持媒介作用。应先将包埋的每块组织周围过多的石蜡切去，组织四周留2mm的石蜡边。 3. 检查切片刀是否锋利。 4. 待切蜡块用冰块冷却，或置于冰箱中冷却， 以增强其硬度。 5. 将切片漂烘仪调至48℃，对水中的气泡，矿 物质杂质和残留的组织碎屑应及时的除去。 6. 准备载玻片，毛笔，镊子，铅笔。 二、常规的制片室应准备以下用品 清洁的载玻片 恒温烤片机 大、中号优质狼毫毛笔 眼科弯镊子，铅笔 展片盆、染色架 三、切片的制作过程 ⑴ 将预先冷却的组织装在切片机