自身抗体的实验室检测及临床意义重点分析.pptVIP

自身抗体的实验室检测及临床意义 北京友谊医院风湿科 宋淑菊 主要内容 自身抗体的概念 自身抗体的分类 自身抗体的命名 自身抗体的检测方法 常见的自身抗体 自身抗体的概念 各种原因造成的机体B细胞产生的针对自身组织成分的抗体，称为自身抗体（autoantibodies）。 自身抗体可以是生理性的，如针对衰老或死亡的自体细胞，机体产生少量的自身抗体，以便被脾、肝及单核吞噬细胞系统的巨噬细胞吞噬，维持机体内环境的生理稳定； 自身抗体也可以是病理性的，引起自身免疫病。 自身抗体的分类 按照自身抗原在体内分布的不同可分为： 器官/组织特异性自身抗体 非器官/组织特异性自身抗体 按照检测自身抗体所用的基质不同可分为： 细胞抗体（以游离的细胞为实验基质） 细胞非特异性自身抗体，如抗核抗体 细胞特异性自身抗体，如ANCA、抗血小板抗体、抗红细胞抗体 组织抗体（以动物组织切片为实验基质） 自身抗体的命名 以首先被检测到该抗体的患者名字的缩写命名：如抗Sm、抗Ro、抗La抗体 以相关疾病的名字的缩写命名：如抗Scl-70、抗SS-A、抗SS-B抗体 以抗原的化学性质进行分类命名：如抗DNA、抗RNP抗体 以抗原的部位进行命名：如抗板层素抗体、抗核膜抗体。 自身抗体的检测方法 对流免疫电泳、免疫双扩散 免疫荧光检测法 免疫印记法 酶联免疫吸附检测法（ELISA） 放射性核素法 酶免疫斑点技术 免疫沉淀法 间接免疫荧光法 细胞核阳性 核仁阳性 细胞浆阳性 分裂期细胞阳性 细胞核阳性 细胞核均质型（Homogeneous）：抗dsDNA、组蛋白抗体、核小体抗体 细胞核周边型（Membranous）：板层素抗体 细胞核颗粒型（Speckled）： 粗颗粒：抗Sm、RNP抗体 细颗粒：抗SSA、SSB抗体 抗dsDNA抗体 荧光模式： 绿蝇短膜虫：动基体均质的或边缘亮度增强的荧光。 Hep-2细胞：细胞核的均质型荧光。 抗dsDNA抗体 自身抗原：位于DNA脱氧核糖磷酸框架上。 临床意义：对系统性红斑狼疮（SLE）特异性高。抗体滴度与疾病活动性存在相关性，因此抗体滴度的检测可为监控治疗提供有用的依据。 抗RNP/Sm抗体 荧光模式： Hep-2片：细胞核粗颗粒，核仁阴性。 肝组织切片：同上。 荧光法不能区分抗RNP和抗体Sm。 抗RNP/Sm抗体 自身抗原：抗原RNP和Sm属于一组小核糖核蛋白（snRNP），由低分子量的RNA和多种蛋白质组成，RNA中尿苷（U-RNA）含量较高。 临床意义：高滴度的抗RNP抗体为 混合结缔组织病（MCTD）的特征，发生率为95~100%。也可出现于SLE，但总是与抗Sm抗体同时出现。抗Sm抗体对SLE具有高度特异性，发生率为20~40%。 抗SSA／SSB抗体 荧光模式 Hep-2片：细胞核呈细颗粒荧光，核仁不发光。 肝组织片：细颗粒荧光。 抗SSA／SSB抗体 自身抗原：SSA抗原是一个小核糖核蛋白，由一个RNA分子和两种不同的蛋白质组成。蛋白质的分子量为52KD和60KD。抗体直接针对蛋白质的抗原决定簇。SSB抗原是分子量为48kD的磷酸化蛋白。 临床意义；最常见于干燥综合征（SS）,也见于SLE、原发性胆汁性肝硬化（PBC），偶见于慢活肝。抗SSA抗体在新生儿红斑狼疮的发生率几乎为100%。 核仁阳性(Nucleolar) 核仁荧光增强，核浆均质型---Scl-70抗体。 核仁均质型---PM-Scl及其他抗原抗体。 核仁细颗粒型---原纤维蛋白抗体。 核仁粗颗粒型---RNA多聚酶-1抗体。 抗Scl-70抗体 荧光模式： Hep-2片：细胞核几乎均质的荧光，核仁荧光加强而且也为均质型，胞浆无荧光。 肝组织片；细胞核颗粒或均质型荧光，常见到细胞核荧光。 抗Scl-70抗体 自身抗原：为DNA拓扑异构酶1，分子量为100KD。在DNA双链的复制和转录中起作用。 临床意义：25~70%的系统性硬化症（PSS）弥漫型患者阳性，局限型硬皮病患者阴性。 细胞浆阳性 胞浆均质型---抗核糖体抗体 细颗粒---抗Jo-1抗体 胞浆颗粒型 粗颗粒---AMA抗体 滴状点状---溶酶体抗体 核周颗粒--高尔基体抗体 胞浆纤维型 细纤维---波形蛋白抗体 环状纤维---原肌球蛋白抗体 针状纤维---肌动蛋白抗体 抗核糖体抗体 荧光模式：