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生物化学大实验 第一部分 蛋白质提取、纯化及分析技术 实验一 多酚氧化酶（PPO）的分离提取 一、原理与目的 多酚氧化酶（有3类，儿茶酚酶、戚酶、甲苯酚酶），它是植物组织内广泛存在的一种含铜氧化酶，位于质体、微体内，可参与植物生长、分化和种皮透性的调节，属于末端氧化酶的一种。 植物受到机械损伤和病菌侵染后，PPO催化酚与O2氧化形成为醌，使组织形成褐变，以便损伤恢复，防止或减少感染，提高抗病能力。多酚氧化酶的活性与植物抗病有一定联系，植物免疫机理现在认为主要是产生对病源有害物质。已发现具有免疫作用的有害物质是多种多样的，概括为两种类型，其中的一种类型就是原有的有毒物质，植物本身含有的一些对病菌有抑制作用，使病菌无法在寄主中生长。很早就发现酚类化合物与抗病有明显的相关，例如原儿茶酸与儿茶酚对有色洋葱磷茎炭疽病菌的抑制作用。多酚氧化酶也可与细胞内其他底物氧化相偶联，起到末端氧化酶的作用： 氧化底物 NADH＋H+ 醌 H2O 底物 NAD+ 酚 1/2 O2 但是PPO的存在是水果、蔬菜褐变的主要原因之一，影响一些经济植物产品的质量。因此，许多学者对此进行研究，并从一些植物组织中分离纯化这种酶，研究酶的理化性质和生化特性。 多酚氧化