DNA重组技术的基本工具(上课用).ppt

1、引导学生与时俱进 基因工程、细胞工程和胚胎工程—在微观方面反映生物科学技术的与时俱进 而生态工程和生物技术的安全性和伦理问题—在宏观方面的与时俱进。 2、正确认识科学与技术的互动 在此次课程内容改革中,技术已升格为八大学习领域之一。 本模块教材的内容,把技术放在了重要位置,包括了若干重要的科研或生产的工艺流程,这对大多数教师都有再学习的必要。 对于学生来说,并非要求他们具体掌握和应用,但通过对这些内容的了解,会较深切地体会到技术的重要性,树立科学与技术互动的观念。 3、关注科学技术的社会应用,增强社会责任感。 基因工程、细胞工程、胚胎工程—不仅是生物科学技术的热点,也是社会关注的热点。 生物技术的安全性和伦理问题的教学—更是直指科学技术的社会责任问题 。 生态工程—则是为了经济和社会的可持续发展产生的综合科学技术,是一项宏大的国民工程。 4、深化热爱生物科学技术的情感,发展探究能力 本模块明确地指出“为学生进一步学习生物科学类专业奠定基础”。 因此,可以估测,在学校选课指导机构的指导下,选修本模块学生的绝大多数,将是有志于学习生命科学基础类和应用类专业的学生。 胰岛素是治疗糖尿病的特效药,长期以来只能从猪、牛等动物的胰腺中提取,产量低成本高。 而微生物生长迅速,容易控制。于是科学家设想,若能将人的胰岛素基因导入微生物体内,并得以表达,就不仅能解决产量问题,还能大大降低生产成本,使药品价格大幅下降。 限制性内切酶作用过程 课本知识回顾 基因工程又叫做 或 。通俗地说,就是按照人们的意愿,把一种生物的某种 提取出来,加以 , 然后放到另一种生物的细胞里, 改造生物的遗传性状。 限制性核酸内切酶 主要是从 的一种酶。 识别双链DNA 分子的某种 ,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的 断开。 形成两种末端 基因进入受体细胞的载体 通常有三种: 作为载体的条件: 在进行基因工程操作中,真正被用作载体的质粒都是在 核苷酸分子的连接: A T G C A T G C DNA聚合酶连接单链DNA 把单个脱氧核苷酸连接到DNA片段上 三、分子运输车——基因进入受体细胞的载体    要让一个从甲生物细胞内取出来的基因在乙生物体内进行表达,首先得将这个基因送到乙生物的细胞内去!能将外源基因送入受体细胞的工具就是载体。 基因工程的载体被喻为: 分子运输车 基因工程的载体来源: 作为基因工程的载体需要怎样的条件呢? 质粒、噬菌体、动植物病毒 议一议 2、能否用SARS病毒作为基因载体? 3、作为载体,若没有切割位点将怎样? 4、携带目的基因的载体是否进入了受体细胞,如何鉴定? 5、假如目的基因导入受体细胞后不能复制,将怎样? 1、从化学组成来看,载体应含有什么成分? 双链DNA 不能 不能进行DNA的重组 载体上应有标记基因 可能造成基因丢失 作为载体的必要条件 1.能自我复制 能进入受体生物细胞并在受体生物细胞内复制2.有一个至多个限制酶切割位点 供外源基因插入 3.有遗传标记基因 供重组DNA的鉴定和选择 4.对受体细胞无害 否则受体细胞将受到损伤甚至死亡 认识常用的载体——质粒 质粒是基因工程常用的载体,一种裸露的、结构简单、独立于染色体或细菌拟核之外,能自我复制的小型环状双链DNA分子,对宿主细胞没有影响,主要存在于细菌和酵母菌体内。其中最常用的是大肠杆菌质粒。 1、能自我复制 2、具有一个或多个限制酶切点 3、具有遗传标记基因 4、对受体细胞无害 质粒作为运载体的条件? 在进行基因工程操作中,真正被用作载体的质粒都是在 天然质粒的基础上进行过人工改造的 基因拼接技术 DNA重组技术 基因 修饰改造 定向地 DNA 重组技术的基本工具 “分子手术刀” ── “分子缝合针” ── “分子运输车”── 限制(性核酸内切)酶 DNA连接酶 基因进入受体细胞的载体 原核生物中分离纯化出来 特定的核苷酸序列 磷酸二酯键 粘性末端 平末端 “分子缝合针” —— DNA连接酶 1、种类: 2、作用部位: 两类 连接黏性末

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