春电泳系统使用及注意事项.pptVIP

5、插梳子时，先将一端插入，然后插入另一端可避免产生气泡。 6、配分离胶和浓缩胶时，TEMED最后加入，TEMED可以催化过硫酸铵产生自由基，从而加速丙烯酰胺凝胶的聚合。 7、使用后用蒸馏水、去离子水冲洗灌胶架和灌胶台。 3、电泳模具装配注意事项 1、确保凝胶盒夹心的短玻板朝内对着U形垫子的凹口。 2、内槽加满缓冲液， 外槽缓冲液没过电极 4、上样注意事项 用注射器或者移液器加样时尽量贴壁。 盖上电泳槽盖时，槽盖上的小孔一定要对准电泳槽对应的凸出部分 5、电泳仪使用注意事项 1、盖上电泳槽盖时，确保盖上的插头和微型槽插孔上的颜色一致。 2、电源线按正确的电极插入电泳仪，确保插头和电泳仪插孔颜色一致。 3、使用后用蒸馏水、去离子水清洗电极装置、固定架和微型槽。 4、只有在按下STOP键后方可关机，严禁直接关闭电源。 THANKS 电泳系统使用及注意事项 科研实验中心 栾广信 电源开关 停止键 启动键 暂停键 恒压模式 恒流模式 参数上下调节键 显示屏 恒压和恒流模式显示灯 电路线插口 电泳仪电源 水平电泳主要用来检测不同大小的DNA或 者RNA片段； 垂直电泳主要用来检测不同大小的蛋白质或者小片段的DNA或者RNA 水平电泳系统 水平电泳槽 凝胶盒 制胶槽 样品梳 琼脂糖凝胶的制备 见视频 水平电泳的使用 见视频 一、水平电泳系统使用注意事项 1、凝胶制备 2、加样 3、电泳条件设置，开始电泳 4、结束电泳，取出样品 1、凝胶制备注意事项 1.1琼脂糖应完全熔化呈清澈、透明的液体。 1.2融化后，当胶冷却至60～70℃时加入染料，充分摇匀。 1.3 倒胶时，动作要轻，避免产生气泡，直到在整个凝胶盒表面形成均匀的胶层。 1.4 科研中心严禁使用EB染料!!!!! 1.5 一般在胶冷却室温30～45min后垂直向上拔出梳子。 1.6 普通电泳时，凝胶的厚度在5～7mm之间最合适。凝胶太薄，样品会溢出；凝胶太厚，会降低电泳图像上样品的信号强度。 2、加样注意事项 负极 正极 加样孔 2.1 将凝胶盒放入电泳槽中，点样孔靠近电泳槽的负极 2.3 上样前样品和Loading Buffer（载样缓冲液）应该充分混匀，否则样品会漂散。 2.2 电泳缓冲液应高于凝胶面2㎜左右。 3、电泳仪使用注意事项 3.1 注意连接方式：连接电泳槽的电线时注意颜色的匹配，黑色连接线连接黑色插孔，红色连接线连接红色插孔。 3.2电泳仪电线插孔连接方式： 黑黑 红红 3.3 不要在层析冷柜中使用电泳仪。 3.4 在暂停状态下可：重新接线，重新选择恒压或者恒流模式，重新设定参数 3.5 如是定时的程序，系统会自动停止运行；如是不定时的程序，按 Stop 按钮终止 4、结束电泳注意事项 1、只有在按下STOP键后方可关机，严禁当仪器处在RUN和PAUSE状态时关机。 2、移除电泳槽盖时要小心，不要使电泳缓冲液溢出。 3、使用后用去离子水清洗电泳槽内部及凝胶盒、制胶槽、样品梳。 垂直电泳系统 SDS胶的制备 见视频 SDS电泳 见视频 二、垂直电泳系统使用方法 1、玻璃盒和灌胶台组装 2、灌胶 3、电泳模具装配 4、上样 5、电泳 1、玻璃盒和灌胶台组装注意事项 1、把灌胶架直立放在一平坦表面上，压力板处于打开位置。 2、放入灌胶架时，使短玻板正对灌胶架前面 3、两玻板底部平齐以免灌胶时漏胶。 4、玻板使用前一定要干净 2、灌胶注意事项 1、把梳子完全放入装配好的凝胶盒，在梳齿下方1cm处的玻璃板上做上标记，以此作为分离胶灌注的平面。取掉梳子。 2、灌胶前，加水检测是否漏胶 3、灌胶前一定要混匀，灌胶时，尽量避免气泡产生 4、分离胶凝固后，插入一张滤纸以吸干分离胶上方两玻璃板间的水或缓冲液。