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2.两次筛选的目的不同。 (1)第一次筛选是将未融合的B淋巴细胞、骨髓瘤细胞以及BB融合、瘤瘤融合的细胞通过选择培养基淘汰,筛选出B瘤融合的细胞。 (2)第二次筛选是将产生特定抗体的杂交瘤细胞通过细胞培养用相应抗原检测的办法筛选出来。因为从体内取免疫过的B淋巴细胞时取出很多种,形成的杂交瘤细胞有很多种,所以需筛选出产生特定抗体的杂交瘤细胞。 3.高考命题角度。 (1)给出单克隆抗体的制备过程,考查对相关过程的理解与掌握。 (2)结合基因工程、细胞工程等知识,综合考查单克隆抗体的制备方法。 跟踪训练 (2013·惠州三模)(双选)下列生产目的与原理(或方法、技术)匹配正确的是( ) 生产目的 原理(或方法、技术) A 三倍体无籽西瓜的生产 组织培养 B 香蕉脱毒苗的生产 基因工程 C 单克隆抗体的生产 细胞工程 D 土壤中分解尿素的细菌的分离 稀释涂布平板法 解析:三倍体无籽西瓜的生产原理是染色体变异,A错误。用脱毒苗进行繁殖,种植的作物不会或极少感染病毒,故香蕉脱毒苗的生产原理是植物细胞工程,B错误。单克隆抗体的生产原理是细胞工程,C正确。土壤中分解尿素的细菌的分离与计数,运用稀释涂布平板法,D正确。 答案:CD * * 细 胞 工 程 植物细胞工程 1.植物组织培养和植物体细胞杂交。 名称 植物组织培养 植物体细胞杂交 原理 细胞的全能性 细胞膜具有一定的流 ?特别提醒: 植物组织培养的6个易错点 (1)幼嫩的组织脱分化较为容易,如茎尖、根尖、形成层细胞易脱分化,而植物的茎、叶和成熟的组织则较难。 (2)对外植体要进行消毒处理,而对各种器械要彻底灭菌。 (3)植物组织培养中用到的有机碳源一般为蔗糖,用葡萄糖也可以,但后者的成本高。 (4)不同细胞的全能性不同,具体表现为:受精卵生殖细胞体细胞,离体细胞的全能性表达与分化程度呈负相关,但生殖细胞特殊。 (5)脱分化形成愈伤组织的过程不需要光,再分化过程需要光,因为愈伤组织利用有机营养成分,而试管苗需要进行光合作用以自养。 (6)植物组织培养中不同培养阶段培养基含有的激素不同,因为培养的目的不同(生根或生芽)。 ③人工种子:以植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽、腋芽等为材料,经过人工薄膜包装得到的种子。 (2)作物新品种的培育:单倍体育种和突变体的利用。 突变体Aa中A为突变新基因,并控制着优良性状,利用单倍体育种方法步骤如下: 优点:稳定遗传,缩短育种年限。 (3)细胞产物的工厂化生产。 细胞产物有蛋白质、脂肪、糖类、药物、香料、生物碱等。 ?特别提醒: 植物细胞工程的3个易错点 (1)对植物体细胞杂交和有性杂交辨析不清。 ①植物体细胞杂交:若两个不同品种的植物细胞A、B进行融合,A含有2X条染色体,2个染色体组,基因型为Aabb,B含有2Y条染色体,2个染色体组,其基因型为ccDd,则新植株应为四倍体,其体细胞中染色体数为2X+2Y,基因型为AabbccDd。从中不难看出,体细胞杂交即两个细胞融合成一个细胞,不管是染色体数、基因型还是染色体组都采用直接相加的方法。②植物有性杂交的结果:子代细胞中染色体数、基因型分别为“X+Y”、“AbcD”或“abcD”或“Abcd”或“abcd”,即先减半再相加。③有性生殖过程中符合孟德尔遗传规律,而植物体细胞杂交不符合孟德尔遗传规律。 (2)利用植物组织培养生产细胞产物时,有时只需将外植体培养到愈伤组织,从愈伤组织中获取产物。 (3)人工种子发育初期需要的营养物质由人工胚乳提供。 【例1】 下图表示利用高秆抗锈病玉米(基因型为AaBb,两对基因独立遗传)的花粉细胞生产人工种子的过程。下列叙述不正确的是( ) A.通过①过程两两融合得到的细胞基因型有9种 B.②③过程培养基中的植物激素种类和比例不同 C.过程④需用秋水仙素处理才能获得可育的人工种子 D.人工种子的种皮中加入植物生长调节剂可促进丛芽的发育 解析:本题以植物组织培养为背景考查生物育种过程。根据自由组合定律,亲代产生的4种基因型花粉(AB、Ab、aB、ab),2粒花粉细胞融合(类似于AaBb个体自交)产生9种基因型的融合细胞。图中②、③分别代表植物组织培养的脱分化和再分化阶段,这两阶段目的不同培养基中生长激素、细胞分裂素的含量和比例不同;融合细胞中染色体组与正常相同,过程④直接培育的人工种子是可育的。 答案:C 规律总结 脱分化和再分化的比较 比较内容 脱分化 再分化 过程 外植体→愈伤组织 愈伤组织→幼苗 形成体特点 排列疏松、高度液泡化的薄壁细胞 有根、芽 需要条件 a.离体 b.适宜的营养 c.生长素/细胞分裂素的比例适中 d.不需光 a.离体 b.适宜的营养 c.生长素/细胞分裂素的比例高或低诱导生根或生芽 d.光照 跟踪训练
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