专题2 细胞工程 植物细胞工程 动物细胞工程 细胞工程 动物细胞培养 体细胞核移植技术 与克隆动物 动物细胞融合 单克隆抗体 植物组织培养 植物体细胞杂交技术 植物细胞工程的基本技术 一、细胞的全能性 1、概念:已分化的细胞仍然具有发育成完整个体的潜能。 2、原因: 体细胞 含全套遗传基因 3、全能性的程度 (1) 受精卵的全能性最高 受精卵 生殖细胞 体细胞 > > (2) 植物细胞>动物细胞 (3) 4、形成不同组织、器官原因: 基因选择性表达 5、条件: (1)离体状态, (2)完全营养物质、激素 二、植物组织培养技术(重点 理解 ) 1、概念: 在无菌和人工控制条件下,将离体的植物器官、组织、细胞,培养在人工配制的培养基上,给予适宜的培养条件,诱导其产生愈伤组织、丛芽,最终形成完整的植株。 2、原理:植物细胞的全能性 3、过程: 外植体 愈伤组织 胚状体、丛芽 植物体 再分化 脱分化 材料(外植体) 适宜的温度、PH值、 养料、激素、充足氧气 前提 避光 需光 无细胞分裂、 分化能力 特点:具分裂、分化能力,具全能性 无定形状态、高度液泡化、排列疏松、无规则、 无叶绿体,不进行光合作用 植物组织培养的实际应用 植物繁殖的新途径 微型育种 作物脱毒 人工种子 作物新品种的培育 单倍体育种 诱导突变体 细胞产物的工厂化生产 人参皂甘的生产 原生质体 番茄细胞 原生质体融合 再生出细胞壁 杂种细胞 脱分化 愈伤组织 杂种植株 再分化 三、植物体细胞杂交技术(重点 理解): 1、过程: 马铃薯细胞 标志:成功融合 人工诱导 去壁 植物组织培养 植物细胞的融合 酶解法(纤维素酶、果胶酶等) 物理法:离心、振动、电刺激等 化学法:聚乙二醇(PEG) 3、优势:(与有性杂交方法比较) 克服植物远缘杂交不亲和的障碍 2、原理: 细胞膜的流动性和细胞全能性 白菜-甘蓝 白菜 甘蓝 4、实例: 生长期短、耐热性强和易于贮藏 番茄-马铃薯(理性图) 比较 植物组织培养 植物体细胞杂交技术 所属范畴 原理 步骤 意义 联系 无性繁殖 细胞全能性 ①脱分化 ②再分化 保持优良性状 繁殖速度快、大规模生产 提高经济效益 杂交技术应用了组织培养 克服不同种生物远缘杂交不亲和的障碍 ①去除细胞壁 ②融合形成杂种细胞 ③组织培养 膜流动性 细胞全能性 无性繁殖 动物细胞工程的基本技术 从动物机体中取出相关的 ,将它分散成 ,然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞 。 1、概念: 动物胚胎或 幼龄动物的组织、器官 细胞生命力旺盛,分裂能力强 使细胞和培养液充分接触 组织 单个细胞 生长和增殖 一、动物细胞培养: 2、原理:细胞增殖 3、过程: 取 的组织、器官 细胞悬浮液 酶 贴满瓶壁的细胞 单个细胞 加入 液 动物胚胎或幼龄动物 胰蛋白 培养 接触抑制 原代 培养 1-10代细胞 传代培养 10—50代细胞 用 处理 胰蛋白酶 维持正常二倍体核型 遗传物质可能改变 50代以后,无限传代 能无限增殖(癌变) 4、条件: 1、无菌、无毒的环境 2、营养 3、温度和PH 4、气体环境: (无菌处理和操作;添加一定量抗生素;定期更换培养液) 补充培养基中缺乏的物质 36.5 +0.5度 ;PH为7.2-7.4。 O2作用:进行 呼吸,提供能量 CO2作用:维持培养液的PH值 (95%空气和5% CO2 ) (合成培养基+动物血清、血浆等) 有氧 (1)生产蛋白质生物制品:病毒疫苗、干 扰素、单克隆抗体等。 (2)获得大量自身的皮肤细胞,用于植皮。 (3)用于检测有毒物质 (4)用于生理、病理、药理等方面的研究,为治疗和预防疾病提供理论依据 5、应用 比较: 培养结果 培养目的 培养基特有成分 培养基性质 原理 比较项目 细胞的全能性 植物体 快速繁殖、培育无病毒植株等 蔗糖、植物激素 固体培养基 植物组织培养 大量细胞 获得细胞 或细胞分泌蛋白 葡萄糖、动物血清 液体培养基 细胞增殖 动物细胞培养 1、概念: 二、动物细胞核移植和克隆动物 将一个动物的细胞核,移入另一个去核的卵母细胞中,使其重组发育成一个胚胎,最终发育成动物个体。 结果: 原理: 分类: 克隆动物(用核移植方法得到的动物) 动物细胞核的全能性 胚胎细胞核移植、体细胞核移植 2、动物
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