实验动物的基本技术和方法教案.pptVIP

第八章 动物实验基本技术及方法 第一节 动物实验前的准备 动物实验前要进行一系列的准备工作，包括理论准备、条件准备、预备实验。 理论准备主要指了解动物实验的基础理论知识，选题立项和设定假设、研究计划和方案的制定、实验方法及实验动物的选择、参考文献的查阅等。 条件准备指仪器设备的备置和校准、药品的配制、器械的准备、实验动物的购入、实验场所消毒与器具配套等。 预备实验是正式实验的预演。 动物实验前的理论准备 有关理论知识的学习 查找有关动物实验的基础知识 常用实验动物的生物学特点及其应用 实验动物的选择原则 动物实验前的条件准备 动物饲养室、动物实验室及饲养器具的准备 应检查动物笼器具的数量、饲养室卫生及消毒情况。 环境控制：理化因素、居住因素、营养因素、生物因素。 动物实验室及相关设施 动物实验设施是指以研究、试验、教学、生物制品和药品生产等为目的，进行实验动物饲养、试验的建筑物、设备以及运营管理在内的总和，包括：一般动物实验环境设施、特殊动物实验设施、实验仪器设备。 用于一般动物实验的环境根据对饲养动物的微生物控制程度和空气净化程度，分为： 普通环境（Conventional condition）普通级动物实验 屏障环境（Barrier Condition）SPF级动物实验 隔离环境（Isolation condition) 悉生和无菌动物实验 空气层流架的操作规程 使用前，?清洁层流架的内环境，消毒，灭菌。 进入层流架的一切物品必须经过灭菌处理。 打开层流架门之前，应加大层流架内的送风量，以避免架内环境污染。 实验操作时，须在超净工作台内进行。 IVC系统的操作规程 1、?? IVC系统的安装和消毒 2、IVC系统上的动物饲养盒必须在超 净工作台 内打开，无菌 操 作。 3、实验完毕，动物饲养盒必须在超净 工作台内盖好上盖 后，方能离开超净工作台，放在IVC系统上。 4、检查进气孔和排气孔是否成功对接 特殊实验动物设施包括三类：感染（生物危害）实验设施、化学污染动物实验设施、放射性污染设施。 生物危害特殊动物实验设施是指用病原体对动物进行实验感染的一种特殊屏障设施。 目前，国内外根据病原微生物对人和动物的危害程度把感染动物实验设施分：BSL1(P1)、BSL2(P2)、BSL3(P3)、BSL4(P4)级。 动物的引进 在动物实验的各项准备工作中，动物的引进是一个重要的环节。在引进动物前，应确定引进动物的种类、品系、规格、数量及动物微生物控制等级等。引进动物前，应检查各项准备工作是否就绪，如饲养动物的器具、器材是否准备好，饲养室的卫生和消毒情况；此外，还应检查动物的笼卡、实验记录本、垫料、饲料、秤等实验必须品是否准备好。 动物的运输 若是从外地购入动物购入动物时，无论运输距离的远近，都应考虑运输环境的温度、湿度、饮食以及途中污染和窒息死亡等问题。 需若是购入或领取清洁级以上的实验动物，应注意运输工具。应采取带有空气过滤膜的无菌运输罐或带过滤帽的笼盒运输，严格检查其密封状况。 新购进的动物最好不要立刻进行动物实验，应将动物雌雄分开，并分笼在隔离区饲养一段时间，以便动物得以恢复体能并适应新的环境。 第二节实验动物的分组和标记 在实验前对动物进行随机分组和编号标记。 　分 组 方 法 随机化分组方法 单纯随机抽样 均衡随机抽样 随机化方法 抽签法：用带数字的卡片（如纸牌）随机抽取。若分两组，可用奇偶数为代表；若分四组，可用4种花色为代表随机分组 抽卡片法随机分组 动物编号 随机分组 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 抽卡数字 8 6 4 7 10 13 7 7 6 2 11 4 2 12 9 除以3的余数 2 0 1 1 1 2 1 1 0 2 2 1 2 0 0 初步分组 c a b b b c b b a c c b c a a 表中b组为6只，a组为4只，需再调整。再重新抽一卡片，将其数字除以6得余数为几即挑第几只放入第三组。 随机数字表法：基本同上 动物的标记 良好的标记方法应保证号码清楚，简便易认、耐久适用，对动物无毒性，操作简便且长时间能够识别。 染色法：大、小鼠、豚鼠常用3.5-5％苦味酸溶液涂成黄色；兔、猫、犬用2％硝