13细胞衰老与凋亡精要.ppt

二、Hayflick界限 Hayflick limitation 1961年，Hayflick 首次报道了体外培养的人成纤维细胞(human fibroblast)具有增殖分裂的极限。他利用来自胚胎和成体的成纤维细胞进行体外培养，发现胚胎的成纤维细胞分裂传代50次后开始衰退和死亡，而来自成年组织的成纤维细胞只能培养15～30代就开始死亡。 。 体外培养人的成纤维细胞，在体外分裂次数有限，证明细胞不是不死的 将老年的人的成纤维细胞与年轻的人的成纤维细胞同时培养，年轻状态的细胞在体外分裂次数更多，说明衰老与供体细胞的年纪有关 老年的人的成纤维细胞与年轻的人的成纤维细胞进行混合和单独培养比较实验，发现二者的分裂次数没有变化，说明与培养的环境无关 利用细胞杂交的方法确定引起衰老的真正原因。年轻的胞质体与年老的完整细胞融合，杂种细胞不能分裂；年老的胞质体与年轻的完整细胞融合，杂种细胞分裂能力与年轻相同，证明细胞核是导致衰老的真正原因 2.Apoptosis, Programmed cell death Biological functions of apoptosis 2002年诺贝尔生理学或医学奖 英国科学家悉尼·布伦纳（Sydney?Brenner） 英国科学家约翰·苏尔斯顿（John?E.?Sulston?） 美国科学家罗伯特·霍维茨（H.?Robert?Horvitz）  ◆2002年的诺贝尔生理学和医学奖授予了在器官发育和程序性细胞死亡研究领域中做出奠基性贡献的3位科学家: ●英国的Brenner、Sulston和美国的Horvitz ●他们创造性地用线虫作为实验模型,实现了对器官发育过程中细胞分裂、分化的原位观察,完成了细胞图谱的绘制, ●在此基础上发现并研究了调控器官发育程序性细胞死亡的关键基因及其功能并进一步在高等哺乳动物中发现了相关功能基因。 Morphological and biochemical characteristics of apoptosis Contrast ofApoptosis and necrosis 3.Molecular mechanisms of apoptosis 细胞凋亡的途径主要有两条，一条是通过胞外信号激活细胞内的凋亡酶caspase、一条是通过线粒体释放凋亡酶激活因子激活caspase。这些活化的caspase可将细胞内的重要蛋白降解，引起细胞凋亡。 ICE(白介素-1-β转换酶)、Apaf-1(凋亡酶激活因子-1)、Bcl-2、Fas/APO-1、c-myc、p53、ATM等。 Apoptosis is carried out by a proteolytic system — caspase How to activate caspases? (1) Why called caspase? Active site: Cysteine Cleavage site: Asparatic acid Cysteine Asparatic acid specific protease Aps-Xxx 天冬氨酸特异性的半光氨酸蛋白水解酶 秀丽隐杆线虫 (Caenorbabditis Elegans) 1031个细胞 ，131个细胞凋亡 找到一系列与细胞凋亡有关的基因 ced-3、ced-4 诱发、启动凋亡 ced-9 抑制凋亡 ① ced-3、ced-4 基因突变或缺失，使凋亡受阻 ② 移入 ced-9 使凋亡受阻 ③ 失去 ced-9 使细胞凋亡 Apoptosis can be divided into two phases： ?Activation phase： The cell responds to “death signals” that commit it to undergoing self-destruction. ?Execution phase： The death sentence is carried out. Apoptosis cells are recognized by phagocytes because they carry exposed markers, called “eat me” signals. The best studied “eat me” signal is the presence of phosphatidylserine molecules in the outer leaflet of PM of apoptot