14环境生物监测与安全性评价精要.pptVIP

7 DNA芯片技术在环境检测中的应用 毒物靶标的筛选； 污染物的分类与分级； 毒性机制及剂量效应关系的确定； 改进生物评价方法； 环境微生物研究。 国外主要公司生产的DNA芯片及其用途 国外主要公司生产的DNA芯片及其用途 8 荧光原位杂交技术检测水体中大肠杆菌 探针主要针对肠杆菌科。 9 分子生物学方法在废水微生物研究中的应用 微生物处理废水过程中经常出现一些故障，缘于对微生物组成、作用及相互关系缺乏深刻的认识； 分子生物学的方法为深入研究废水生物处理过程中各种微生物的作用，深刻理解废水处理过程的本质，提高处理系统的性能以及进行工艺革新等提供了新的强有力的方法和手段，为了解这些处理系统中的微生物生态并对处理过程进行工程控制提供了可能； 便于更好地理解现有的生物处理过程及开发新工艺。 微生物细胞内的信息流动 分子生物学方法探询的目标 以RNA为基因目标的优点 rRNA存在于所有的生物细胞中； 生物细胞内含有大量的核糖体，rRNA通常容易检测； rRNA被包埋于核糖体中，通常较为稳定； 16S rRNA，大约含有1600个碱基对，可以提供足够的进化信息； 从环境样品中分离出rRNA并用于微生物系统发育、种类鉴定、多态性及多样性研究的方法已经全面建立。 利用rRNA序列研究微生物群落特征的方法 活性污泥中微生物多样性的研究 大量的16S rRNA基因序列研究表明，污水处理系统中常出现的微生物包括α-，β-，γ- Proteobacteria（变形菌门），Bacteroidetes（拟杆菌门）和Actinobacteria（放线菌门）； 定量FISH需要用于研究废水处理过程中的实际微生物种群鉴定； 半自动数字图像分析方法能够加快分析速度，得到清晰完整的微生物图像。 丝状细菌的研究 一定数量的丝状菌对于污泥絮体的形成是重要的，但大量生长的丝状菌会带来泡沫，或引起二沉池活性污泥沉降性变差（污泥膨胀）； 丝状菌难于培养，对其了解不多； 分子生物学研究表明丝状菌不宜仅通过形态特征进行分类，利用16S rRNA分子探针可以定量研究丝状菌与污泥形成泡沫的关系； 可以探明丝状菌在污水处理过程中的生理特性，便于对其有效控制。 脱氮微生物的研究 分子生物学分析表明，硝化活性污泥中，属于β-Proteobacteria（变形菌门）的各种氨氧化菌大量存在，Nitrosospira（亚硝化螺菌属）的氨氧化菌并不重要； 多数废水处理厂中，Nitrospira（硝化螺菌属）类而非Nitrobacter（硝化菌属）是占优势的亚硝酸氧化菌； 由于细菌和古细菌中，能够利用硝酸盐或亚硝酸盐进行厌氧呼吸的微生物广泛存在，反硝化过程中其主要作用的微生物尚无法鉴别。 除磷微生物的研究 分子生物学研究表明，以前人们认为的传统除磷微生物Acinetobacter（不动菌属），在EBPR工艺中并不起除磷作用； 最近鉴定得到了聚磷菌（PAOs）中与Rhodocyclus（红环菌属）有关的β-Proteobacteria（变形菌门）； 基于克隆基因库，设计了针对其16S rRNA的分子探针，表明Microlunatus phosphovorus（积磷小月菌）占聚磷菌的1/3； 非聚磷菌-聚糖原菌（GAOs）的出现会导致系统失败。 10 现代生物技术的安全性问题 生物安全涉及对转基因生物、病原微生物、外来有害生物等生物体可能产生的潜在风险或现实危害的防范和控制； 转基因生物安全： 环境领域，安全性评价，法律法规。 生物入侵及其控制： 外来物种，防治方法。 现代生物技术的伦理问题： 生态伦理，生物多样性。 * Founded in 1895 Founded in 1895 第14讲 环境生物监测与安全性评价 1 生物传感器简介 生物传感器是一类特殊的化学传感器，具有选择性高，灵敏度高，稳定性好，成本低，能在复杂的体系中进行快速连续检测等优势，在环保领域具有广阔的应用前景； 生物传感器是将生物感应元件的专一性与能够产生与待测物浓度成比例的信号传导器结合起来的分析装置； 最先使用的是酶电极，衍生物有微生物电极、细胞器电极、动植物组织电极以及免疫电极等新型生物传感器。 生物传感器的基本组成和工作原理 由敏感元件，即生物元件和信号传导器组成： 生物元件包括：生物体、组织、细胞、细胞器、细胞膜、酶、酶组分、感受器、抗体、核酸、有机物分子； 传导器包括：电势测量式、电流测定式、电导率测量式、阻抗测定式、光强测量式、热量测定式、声强测量式、机械式、“分子”电子式； 工作原理决定于敏感元件和待测物质之间的相互作用： 将化学变化转化为电信号； 将热变化转化为电信号； 将光效应转化为电信号； 直接产生电信号； 生物传感器基本