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DNA重组及重组DNA技术;DNA重组(DNA recombination)是指不同DNA分子断裂和连接而产生DNA片段的交换并重新组合形成新DNA分子的过程。
重组DNA技术(recombinant DNA technology)是指在体外将两个或两个以上DNA分子重新组合并在适当细胞中增殖形成新DNA分子的过程。 ;第一节自然界的DNA重组和基因转移;DNA重组;第二节 重组DNA技术;重组DNA技术的发展史;重组DNA技术相关概念;重组DNA技术,又称分子克隆或DNA克隆或基因工程技术。
其主要过程包括:在体外将目的DNA片段与能自主复制的遗传元件(又叫载体)连接,形成重组DNA分子,进而在受体细胞中复制、扩增,从而获得单一DNA分子的大量拷贝。
目的:① 分离获得某一感兴趣的基因或DNA
② 获得感兴趣基因的表达产物(蛋白质);工 具 酶;限制性核酸内切酶;第一个字母取自产生该酶的细菌属名,用大写;
第二、第三个字母是该细菌的种名,用小写;
第四个字母代表株;
用罗马数字表示发现的先后次序。;Ⅱ类酶识别序列特点——回文结构(palindrome) ;; 定义
为携带目的基因,实现其无性繁殖或表达有意义的蛋白质所采用的一些DNA分子。;质粒(plasmid):能在宿主细胞内独立自主复制;带有某些遗传信息, 会赋予宿主细胞一些遗传性状。 ;pUC18质粒载体图谱;17;18;基本原理; 以
质
粒
为
载
体
的DNA
克
隆
过
程;21;22;23;载体;25;;Eco RⅠ切割位点;Eco RⅠ;;;31;32;插入失活筛选带有重组载体的克隆;α互补筛选(蓝-白筛选);菌落或噬斑原位杂交筛选重组体;重组DNA技术操作过程可形象归纳为: ;重组DNA技术操作的主要步骤;38;第三节
重组DNA技术在医学中的应用;利用基因工程生产有药用价值的蛋白质、多肽产品已成为当今世界一项重大产业,并将有望成为21世纪的支柱产业。
美国Eli Lilly公司于1982年首先利用重组DNA技术合成人胰岛素并投放市场,标志着生物工程药物时代的开始。迄今为止,已有50多种基因工程药物上市,近千种处于研发状态,形成一个巨大的高新技术产业,产生了不可估量的社会效益和经济效益。;重组DNA医药产品; 疾病相关基因的发现与鉴定
转基因和基因打靶
加速了人类基因组计划的完??
疾病的基因诊断和基因治疗
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