DNA重组技术的基本工具(讲课)概要.pptx

你还记得我们吗？;选修3 ;专题1.基因工程的基本内容;基因工程的概念：;别名： 操作环境： 原理： 操作水平： 结果：;; 基因工程的概念;普通棉花　　 抗虫棉;基因工程培育抗虫棉的简要过程：;解决培育抗虫棉的关键步骤需要哪些工具？; 1 .1、DNA重组技术的基本工具; 1、简称： 2、分布： ??; 原核生物易受自然界外源DNA的入侵，但生物在长期的进化过程中形成了一套完善的防御机制，以防止外来病原物的侵害。限制酶就是细菌的一种防御性工具，当外源DNA侵入时，会利用限制酶将外源DNA切割掉，以保证自身的安全。所以，限制酶在原核生物中主要起到切割外源DNA、使之失效，从而达到保护自身的目的。;思考与探究 P7;限制酶的识别特点;EcoRⅠ （在G与A之间切割）; ?? 3、特点: ;;　;什么叫黏性末端？;SmaⅠ; ?? ④作用： ⑤结果：; ?? 3、特点: ;要想获得某个特定性状的基因必须要用限制酶切几个切口？可产生几个黏性(平)末端？;Go back;1、作用:; 可把黏性末端之间的缝隙“缝合”起来，;　;3、类型：;; 3、类型; 例.限制酶在DNA的任何部位都能将DNA切开吗？以下是四种不同限制酶切割形成的DNA片段:你是否能用DNA连接酶将它们连接起来？ ;4、DNA连接酶有连接单链DNA的本领吗？; 1、载体必须具备的条件： ①能够在宿主细胞中复制并稳定地保存； ②具有一至多个限制酶切点，以便与 外源基因连接 ③具有某些标记基因，便于进行筛选。 ④对受体细胞无害 ;2、常用的载体： 质粒， λ噬菌体的衍生物， 动植物病毒等;;工具3：运载体;3、天然的DNA分子可以直接用做基因工程载体吗？为什么？;2和7能连接形成…ACGT… ????????????? …TGCA…； 4和8能连接形成…GAATTC… ???????????? …CTTAAG…； 3和6能连接形成…GCGC… ???????????? …CGCG…； 1和5能连接形成…CTGCAG… ???????????? …GACGTC…。;1、在基因工程中，切割运载体和含有目的基因的DNA片段，需使用（ ） 同种限制酶 B. 两种限制酶 同种连接酶 D. 两种连接酶 ;;3、下列不适合用于基因工程的运载体 是（ ） A、质粒 B、噬菌体 C、细菌 D、病毒;5、以下是两种限制酶切割后形成的DNA片段，试分析： ①GC… ②AATTC… ③ …GC ④ …CTTAA CG… G… …CG …G ;;;;;;4) DNA体外重组的实现 ;1973年博耶和科恩使重组DNA转入大肠杆菌中,转录出相应的mRNA,并使外源基因可以在原核细胞中成功表达,至此表明基因工程正式问世.;1980年第一个转基因小鼠问世