C-反应蛋白及临床应用概要.ppt

修饰的CRP(m-CRP) -Modified CRP 目前认为m-CRP是原CRP的单体。 与天然CRP不同,表现在分子大小,溶解度,抗原性,带电荷数等方面的差别. m-CRP具抗菌作用。 m-CRP具有强大地诱发炎症的作用。 方　法　　　　　　灵敏度　　　　　参考献 试管内沉淀试验　　- 　　　　　JExpMed1930;52∶561 毛细管内沉淀试验　　10～20mg/L　　　AmJMed1950;8∶445 改良平板双扩散法　　10～20mg/L　　　IntArchAllergy1962 改良琼脂柱扩散法　　3.0mg/L　　　　　ProcSocExpBiol1955 改良单扩散法　　　　1.0mg/L　　　　 ActaPatholMicrobiolScand 琼脂糖凝胶电泳法　　1.0mg/L　　　　　ClinChimActa1969 放射电免疫扩散法　　10μg/L　　　　　JClinLabInvest1973 补体结合试验　　　　0.6mg/L　　　　　ProcSocExpBiol1954 胶乳凝集试验　　　　1.0mg/L　　　　　Nature(London)1961 高敏乳胶增强浊度 0.35mg/ml Dade Germany2000 荧光抗体法 — Nature(London)1961 放射免疫测定法 3μg/L JLabClinMed1976 检测方法 CRP检测方法 -　免疫沉淀试验 检测CRP原始方法. 将兔抗CRP血清吸入毛细管内。 把它浸入被测血浆或血清内,因毛细管虹吸作用被吸入,与抗CRP血清形成接触界面。 这种方法较粗糙,取得结果时间较长,也不太正确可靠. CRP检测方法 -　免疫浊度法 可溶性CRP-Ag与可溶性抗CRP-Ab反应,形成可见的网络状沉淀性IC复合物点. IC复合物对光具有散射作用,使溶液具有肉眼尚不可见的浊度。 在被测样品中加抗血清后一定时间,测定反应系统散射光强度或浊度变化,可对被检物及其浊度加以检测。 根据仪器的光学系统,浊度法分为散射浊度法和透射浊度法两类。 许多自动化生化分析仪和自动化免疫测定仪都可CRP测定项目。 CRP检测方法 -　胶乳凝集试验(LAT) 将强化的兔抗CRP抗体固定于胶乳微粒上。 加入被测样品后与CRP在3分钟内形成肉眼可见的凝集物。 胶乳强化浊度法的灵敏度优于传统浊度法,试剂稳定性佳。 检测方法 - 标记免疫测定 ELISA和免疫发光法和化学发光法等都可用于CRP的测定。 化学发光法的灵敏度和定量精确度可与RIA媲美,而无同位素污染,试剂稳定,分析速度快。 CRP-POCT(床边试验)法－ ELISA干片法。 把磷脂酰胆碱(PC)化学交联固定于载体。 被测CRP与载体的PC结合。 被酶标记的抗CRP单抗结合。 可灵敏、特异性检测CRP,约5分钟可得结果.。 检测方法 - 胶乳增强试验（shCRP）： 常规CRP检验方法可在感染或组织损伤时检测出CRP10mg/L。 该检测方法具有较高的灵敏度。 这个水平（0.1～10mg/L）的C反应蛋白又被称为超敏C反应蛋白（hsCRP）。 ?? CRP检测的评估 1、半定量：胶乳凝集试验等已弃用。 2、定量： 散射免疫比浊法、透射免疫比浊法：是目前常用方法。检测限度为5～150 mg／L ，CV＜5% 。 胶乳增强试验-shCRP检测：很大程度提高了敏感度。酶免疫分析和荧光免疫分析：有潜在的灵敏度优势。 胶乳增强试验-shCRP检测方法很大程度提高了敏感度。 CRP检测对标本的采集也无特殊要求。 高浓度的类风湿因子可产生CRP假性升高。 CRP筛查的费用远小于其他心血管检查的费用。 临床应用____参考范围 CRP 参考范围 中值 成人和儿童 0.068～8.2 mg/L 0.58 mg/L 新生儿，脐血 ≤0.6 mg/L 出生后第4天至1个月的婴儿 ≤1.6 mg/L 分娩母亲 ≤47 mg/L 临床意义 器质性疾病的筛选 急性或慢性炎症如伴有细菌感染。 自身免疫或免疫复合物病。 组织坏死和恶性肿瘤。 临床意义—感染的诊断与鉴别 CRP在细菌感染发生后6～8h即开始升高，24～48h达到高峰，在感染消除后其含量急骤下降，一周内可恢复正常。 CRP在病毒感染时无显著升高。 革兰阴性感染：可发生最高水平的CRP，有时高达 500 mg／L。 革兰阳性菌感染和寄生虫感染：通常引起中等程度的反应，典型的是在100 mg／L 左右。 病毒感染：引起的反应最轻，通常不超过50 mg／L，极少超过 100