生物技术基因工程2分析报告.ppt

pUC19 抗虫棉基因的转化过程 SSR ? 重复单元： 1~ 6bp,如 CA, CTCG ? 重复次数：5~ 30 次 ? 覆盖长度：10~300 bp ４、序列特征扩增区域 (SCAR) 　　建立在DNA测序基础上的分子标记。 先作RAPD、DNF\SSR分析，然后把标记片段克隆和测序，根据原片段两端的序列设计一对特定引物（通常16-24个碱基），再进行PCR特异扩增，这样就可把与原RAPD片段相对应的单一序列(位点)扩增出来。这样的DNA片段与原先的性状存在对应关系，就称为该性状的SCAR标记。 Random primer Random primer specific primer 1 specific primer 2 RAPD marker SCAR marker Sequencing 随机产物：多种 SCAR产物：一种 　　SCAR比RAPD和其它利用随机引物的方法在基因定位和作图中的应用更好，因为它有更高的可重复性（原因是使用的引物长）。 (三)建立在酶切和PCR基础上的分子标记 6、扩增片段长度多态性(AFLP)： 　建立在RFLP和PCR基础上的标记方法。 　其基本步骤是：把DNA进行限制性内切酶酶切，然后选择特定的片段进行PCR扩增，在测序胶上分开这些扩增产物并检测其多态性。 AFLP的实验过程 AFLP A B 荧光标记全自动AFLP原理与方法 For ABI 377 DNA Sequencer and AFLP Kits AFLP SSR 多态性 * * * * 3、渗调蛋白基因 (1)渗调蛋白(osmotin，OSM)，植物中普遍存在 (2)作用机理：渗透调节 4、胚胎后期丰富蛋白(lateral embryo aboundant protein)基因 (1)植物来源：禾本科植物 (2)作用机理：渗透调节 5、乙醇脱氢酶基因 (1)植物中普遍存在：Adh-1,Adh-2 (2)耐涝作用机理：缺氧ATP合成，解毒 (八)耐贮性改良 1、成熟激素相关基因改良:抑制乙烯产生作用 (1)反义ACC合成酶(ACC synthase) (2)反义ACC氧化酶(ACC oxidase, Ethylene forming Enzyme, EFE) (3)反义乙烯受体(Ethylene reciptor, ER) 反义RNA技术 An antisense oligo binds the sense mRNA and prevents synthesis of the protein coded by that mRNA 2、细胞壁降解相关基因改良：抑制细胞壁降解 (1)反义多聚半乳糖醛酸酶基因（PG）： (2)反义果胶裂解酶基因（PL） (3)反义果胶甲脂化酶基因（PE） (4)反义半乳糖苷酶基因(Gal) (5)反义木聚糖内基转移酶基因(XET)： (6)反义纤维素酶基因(cellulase) (7)反义聚木糖酶基因(XGase) 3、软化相关胞内物质代谢基因 (1)反义淀粉酶基因(amylase) (2)反义脂氧合酶基因(LOX) 4、抗病性相关基因 (1)PGIP (九)品质改良 1、营养成分改良 (1)贮藏蛋白：小麦醇溶蛋白基因：增加新蛋白质 (2)脂肪改良：LOX基因：脂肪酸饱和度改变 2、风味改良 (3)甜味蛋白：来源于甜玉米，改变风味 ３、外观品质改良 (4)着色度改良：色素基因工程：花色素 * 转 基 因 西 红 柿 散发柠檬香味和玫瑰芳香的转基因西红柿 * 无子的转基因茄子(意大利)??  * (十)丰产性改良 1、RuBP羧化酶Rubisco基因改良：提高二氧化碳的羧化效率，提高光合，进而提高产量 2、磷酸烯醇式丙酮酸异构化酶PEPCase基因改良：提高二氧化碳羧化效率，进而提高光合、产量 3、磷酸蔗糖合成酶基因改良：促进光合产物运输，减少反馈抑制 4、ADPG焦磷酸酶基因改良：促进运输，减少反馈抑制 (十一)早实性改良 １、lfy基因：缩短童期(植物不能开花结果的阶段) (十二)农艺性状改良 １、矮化性状：矮化基因(dw) ２、柱形性状：柱形基因(co) ３、短枝性状：短枝基因(sp) ４、生根能力：生根基因(rol) 第七节 植物性状分子标记及应用 一、植物的性状标记 二、植物性状的分子标记 三、植物性状分子标记的方法 四、植物性状分子标记的应用 一、植物的性状标记 植物的某些遗传性状和植物的某一外在形态特征、生理生化指标、生物大分子特征等存在对应关系。 当这个特征与这个遗传性状存在较严格的遗传连锁关系时，这个特征就是该性状的遗传标记。 早熟 晚熟 绿叶 红叶 红叶是早熟性状的标记 标记分类： 1