三、免疫组化信号转导解析.ppt

§3. 细胞信号传递 §3.1 细胞信号分子及其受体 §3.2 G蛋白偶联受体介导的信号转递途径 §3.3 酶偶联受体介导的信号转递途径 §3.1 细胞信号分子及其受体 一、细胞间和细胞内的信号分子 （一）细胞间的信号分子 1、定义： 由细胞分泌的调节靶细胞生命活动的化学物质。 2、分类根据其作用距离范围，分三大类： （1）内分泌(endocrine) ：信号分子通过血液系统运输到靶位点作用距离最远，例：激素(hormone)。 （2）旁分泌(paracrine)系统的化学信号：细胞因子，作用于周围细胞（μm），例：细胞因子 （3）自分泌(autocrine)：作用于自身，例：生长因子 （二）细胞内的信号分子 1、定义： 在细胞内传递细胞调控信号的化学物质。 2、第二信使： 在细胞内传递信息的小分子化合物包括：Ca2+、DAG、IP3、 cAMP、cGMP等。 二、信号分子受体的类型 （一）受体的定义 细胞膜上或细胞内能特异识别生物活性分子并与之结合，进 而引起生物学效应的特殊蛋白或糖脂，称受体(receptor) 。 配体(ligand)—能与受体呈特异结合的生物活性分子。 1、细胞表面受体 三、细胞内信号传递途径的共同特征 1、受体接受信号，通过胞内信号蛋白中继与传递 ，调节基因表达，改变细胞行为。 主要是G蛋白偶联受体和酶偶联受体介导的途径 主要是通过蛋白磷酸化级联反应传递信号。 蛋白磷酸化由蛋白激酶（Ser/Thr激酶和Tyr激酶）催化 2、信号必须通过整合，才能引发生物效应。 四、信号分子NO NO是在NO合成酶催化下，由Arg脱氨基产生的。 是胞外气体信号分子，分子小，疏水性强，易于通过扩散进入胞内调节靶蛋白的活性 局部作用，寿命短 例：硝酸甘油治疗心绞痛机制—硝酸甘油产生NO，使心肌舒张，增加血流量 CO也是类似的气体信号分子?。 §3.2 G蛋白偶联受体介导的信号传递途径 一、G蛋白偶联受体和G蛋白 （一） G蛋白偶联受体 由单一肽链组成的，具有七个跨膜的α螺旋 N端：位于胞外，配体结合结构域 C端：位于胞内，含多个Ser/Thr磷酸化位点，与受体脱敏有关 C3环：胞内第五和第六跨膜α螺旋之间的环型肽段，G蛋白结合 位点，配体与受体结合后，通过C3结合并活化G蛋白。 （二）G蛋白 1、 G蛋白的特点 G蛋白—GTP结合蛋白(GTP bingding protein,G protein) 是一类和GDP或GTP结合、位于细胞膜胞浆面的外周蛋白 由三个亚基组成：α、β、γ 两种构象： 活化型(GTP)、非活化型(GDP) 效应酶：腺苷酸环化酶（AC）；磷脂酶C（PLC）等 低分子量G蛋白(small G protein)：小G蛋白：Ras蛋白 2、G蛋白的种类 ： 分为3个家族，见下图： G蛋白介导的主要信号转导途径 一、cAMP-蛋白激酶A途径 1、cAMP的合成与分解 2、cAMP的作用机制 cAMP通过激活cAMP依赖性蛋白激酶（PKA）系统来实现的 二、Ca2+-依赖性蛋白激酶途径 （一）Ca2+-磷脂依赖性蛋白激酶途径 1、IP3和DAG的生物合成和功能 2、PKC的生理功能 （1）对代谢的调节作用 Ser/Thr残基磷酸化 靶蛋白：质膜受体、膜蛋白和多种酶 （2）对基因表达的调节作用 早期反应、晚期反应 （二）Ca2+-钙调蛋白依赖性蛋白激酶途径 CaM为钙结合蛋白 4个Ca2+结合位点 Ca2+-CaM激酶的底物谱广泛 Ser/Thr残基磷酸化 激活AC、磷酸二脂酶 调节PKA §3.3 酶偶联受体介导的信号转递途径 一、受体Tyr激酶 （一）类型 RTK是绝大多数生长因子的受体 根据结构特征，分为6类 （二）RTK的结构 （三）RTK的靶蛋白 与RTK胞质结构域相结合的靶蛋白分两大类： 1、接头蛋白(adapter protein)： 如生长因子受体结合蛋白（GRB-2），它本身无信号作用，连接 活化的RTK与其他信号蛋白。 2、参与信号传递的酶蛋白： 如GAP、PI3K、PLC-γ、Src蛋白等。 二、 SH2和SH3结构域 RTK的靶蛋白的两个高度保守的结构域：SH2和SH3结构域 SH2和SH3结构域：因与Src蛋白的结构域同源而得名。 SH2：约100AA，可识别、结合并活化RTK的P-Tyr，及其他含有P-Tyr 的信号蛋白 SH3：约50AA，在信号转导途径中介导蛋白质之间的相互作用 Src蛋白：c