色谱分析平面色谱法精要.ppt

（二）相平衡参数 相平衡参数：分配系数K和容量因子k 前面推导出 R’表示单位时间内一个分子在流动相中出现的几率，也可以表示组分分子在平面上移动的速度. Rf＝L/L0=ut/u0t，定时展开时R’＝ Rf 讨论 ⑴ Rf与K有关，即与组分性质（溶解度）以及薄层板 和展开剂的性质有关，K↑大，Rf↓小 ⑵薄层板一定，Rf只与组分性质有关，对于极性组分， 展开剂极性↑大，Rf↑大（容易洗脱） 展开剂极性↓小，Rf↓小 （不容易洗脱） ⑶Rf＝1 K或k=0 组分在前沿 Rf＝0 K或k=∞ 组分在原点 韩景田 3/26/2011 色谱分析法 * 上一内容 下一内容 回主目录 返回 平面色谱法 《色谱分析法》系列课件 第五章 平面色谱法 第一节 概 述 1938年俄国人首先实现了在氧化铝薄层上分离一种天然药物。1965年德国化学家出版了“薄层色谱法”一书，推动了这一技术的发展。 因TLC法设备简单，分析速度快，分离效率高，结果直观，很快被用作定性和半定量的方法。 70年代中后期发展了高效薄层色谱。80年代以后发展了薄层色谱光密度扫描仪，和各步操作的仪器化，并实现了计算机化。 Thin-layer chromatography of standard PL samples Fig.1 Description: The thermo-stability of phospholipids and lysophospholipids was determined by one dimensional thin-layer chromatography (TLC). A chloroform-methanol-28% aqueous ammonia solvent system (65:35:8, v/v) provided clear separation of major phospholipids (PL) and their lyso forms. The 5% (w/v) dodecamolybdophosphoric acid solution in ethanol was used as spray reagent. The thermo stability of phospholipids was evaluated by compare the spots density and area of PL samples with varying heat treatment. Rapid determination of thermo-stability of phospholipids by TLC 第五章 平面色谱法 定义：平面色谱法(plane chromatography)是在平面上进行分离的一种色谱方法。 一、平面色谱法的分类和原理 分类 纸色谱法：滤纸为载体，纤维素的羟基与水结合形成液-液分配色谱固定相，展开剂由于毛细作用沿滤纸向上运动。---分配色谱 薄层色谱法：将吸附材料均匀固定在载板上，由于吸附剂颗粒间的毛细作用，展开剂（流动相）上行。 -----吸附色谱 薄层电泳法：荷电组分样品负载于惰性支持介质（纸、纤维素、聚丙烯酰胺凝胶等），在电场作用下进行分离。 二、平面色谱法的基本流程 确定样品的预处理方法 选择吸附剂和展开剂 制备层析用薄板 点样 层析分离 显色 定性或定量分析 分析结果，给出结论 三、平面色谱法参数 （一）定性参数 1. 比移值Rf (retardation factor; Rf) 溶质移动的距离与流动相移动距离之比 Rf范围： 0 Rf 1 Rf = 0.2~0.8（常用） Rf = 0.3~0.5（最佳） L ds1 ds2 图18－1 2. 相对比移值Ris 讨论 参考物与被测组分在完全相同条件下展开 可以消除系统误差，大大提高重现性和可靠性； 参考物可以是后加入纯物质，也可是样品中已知组分 相对比移值Ris与组分、参考物性质及色谱条件有关，范围可以大于或小于1 （二）面效参数 1、理论塔板数 N=16(ds/W)2 ds:原点到斑点中心的距离 W：组分斑点的纵向宽度 2、塔板高度 H=ds/N=(Rf L)/N ds：原点到展开剂前沿的距离 N越大，H越小。 与展开剂的速率常数、组分在展开剂中的扩散系数、吸附剂的平均粒径及其粒度分布等因素有关。 （三）容量因子k’与比移值Rf的关系 容量