生物基因工程解析.pptxVIP

基因工程;1.限制性核酸内切酶（限制酶） ;3.运载体 ;4.基因工程中形成的重组DNA是DNA分子片段的连接，而不是合成DNA分子或转录合成mRNA的过程;;;Ⅱ构建表达载体（核心）： 目的基因、启动子、终止子、标记基因 Ⅲ导入受体细胞 （１）植物细胞 农杆菌转化法： 基因枪法 花粉管通道法 （２）动物细胞：显微注射技术 受体细胞：受精卵（a含有目的基因表达所需的物质；b具有全能性） （３）微生物细胞：原核生物（繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少）作为受体细胞 大肠杆菌：Ca２＋处理细胞（感受态细胞） Ⅳ目的基因的检测与鉴定 １）检测：DNA分子杂交技术（原理：碱基互补配对） ①目的基因作探针　②转录出mRNA③翻译成蛋白质：抗原抗体杂交 ２）鉴定：个体生物学水平;７.逆转录形成的目的基因不含内含子 原因：mRNA形成时切掉了内含子转录的RNA 内含子：能转录不能翻译 外显子：能转录能翻译 真核生物基因编码区：内含子和外显子 原核和真核生物的非编码区：对遗传起调控作用（启动子和终止子）;９.杀虫的基因：Bt毒蛋白基因（我国转基因抗虫棉）、蛋白酶抑制剂基因、淀粉酶抑制剂基因、植物凝集素基因;13.工程菌 第一种基因工程药物---重组人胰岛素 细胞因子、抗体、疫苗、激素等。 我国生产：白细胞介素-2、干扰素（糖蛋白，为我国第一个批量生产的药物）、乙肝疫苗;题型一 .科学家将外源目的基因与大肠杆菌的质粒进行重组，并在大肠杆菌中成功表达。下图表示构建重组质粒和筛选含目的基因的大肠杆菌的过程。请据图回答问题;（1）步骤①和②中常用的工具酶是______________和______________。 （2）图中质粒上有抗氨苄青霉素和抗四环素两个标记基因，经过①和②步骤后，有些质粒上的______________基因内插入了外源目的基因，形成重组质粒，由于目的基因的分隔使得该抗性基因失活。 （3）步骤③是____________________________的过程，为了促进该过程，应该用______________处理大肠杆菌。 (4)步骤④将三角瓶内的大肠杆菌接种到含四环素的培养基C上培养，目的是筛选______________，能在C中生长的大肠杆菌有_______种。 (5)步骤⑤：用无菌牙签挑取C上的单个菌落，分别接种到D（含氨苄青霉素和四环素）和E（含四环素）两个培养基的相同位置上，一段时间后，菌落的生长状况如图所示。含目的基因的菌落位于_____（D、E）上，请在图中相应的位置上圈出来。 ;答案：6.（1）限制性核酸内切酶 DNA连接酶 （2）氨苄青霉素抗性基因 （3）将重组质粒（目的基因）导入大肠杆菌（受体细胞） CaCl2溶液 （4）含四环素抗性基因的大肠杆菌（含抗性基因的大肠杆菌给分，回答含目的基因的大肠杆菌不给分） 2 （5）E（评分标准：在两个菌落中圈一个也可给分 ） ? ;变式训练：某质粒上有SalⅠ、HindⅢ、BamH I三种限制酶切割位点，同时还含有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因。利用此质粒获得转基因抗盐烟草的过程如图所示，请回答下列问题。;（1）将含有目的基因的DNA与质粒分别用Sal I酶切，酶切产物用______________催化连接后，两个DNA片段的连接结果有 种。 （2）在构建重组质粒时，应选用 两种酶对 进行切割，以保证重组DNA序列的唯一性。（3）为筛选出导入了重组质粒的农杆菌，应在培养基中加入__________________，理由是 。 （4）将转入抗盐基因的烟草细胞培育成完整的植株需要用_____________________技术， ;答案3.（1）DNA连接酶 3 （2）SalⅠ、HindⅢ【共1分】 质粒和含抗盐基因的DNA【各1分】 （3）氨苄青霉素 重组质粒中含抗氨苄青霉素基因而抗四环素基因被破坏【各1分】 （4）植物组织培养 细胞增殖和分化【各1分】 植物激素（生长调节剂或生长素和细胞分裂素） ;题型二：继哺乳动物乳腺生物反应器研发成功后，膀胱生物反应器的研究也取得了一定进展。最近，科学家培育出一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中。请回答： （1）将人的生长激素基因导入小鼠受体细胞，常用方法是????????????????。 （2）在基因工程中，将目的基因与运载体结合时必须用??????? ?酶和???? ??酶。常用的运载体有????????等，而作为运载体必须具备相应的条件，例如应具有???? ?以便进行筛选。进行基因转移时，通常要