植物生理生化实验报告总结最终定稿-副本.docVIP

《植物生理生化实验》综合性实验总结 （2010-2011学年第一学期） 课程：《植物生理生化实验》—生化实验21学时 成绩： 2 NaCl溶液浸种对水稻种子萌发过程若干生化指标的影响 综 合 性 实验项目 面向专业 09级农学、植保、农资、园艺、设施、茶学、林学、水保、制药、生安等 本项目学时 14学时 （总学时45） 实 验 内 容 简 介 本综合项目以水稻种子为材料，分别用蒸馏水、60ml/LNaCl和600ml/LNaCl溶液浸种→催芽→测定不同处理的发芽种子的游离氨基酸、可溶性蛋白质、淀粉酶和同工酶项目。实验要求：掌握分光光度计、离心机、电泳仪等仪器的使用方法以及电泳技术的基本操作、标准曲线的制作，并综合分析NaCl浸种胁迫对水稻种子生理特性的影响机制。 综合性实验总结报告： 题目：NaCl溶液浸种对水稻种子萌发过程若干生化指标的影响。 摘要：目的：为农作物的耐盐育种和栽培提供试验数据。方法：将水稻种子分别用蒸馏水、60mmol/LNaCl、600mmol/LNaCl溶液浸种，本实验通过研究水稻种子在被不同浓度NaCl浸种和清水浸种后的各种生理活性比较，运用分光光度计、离心机、电泳仪等仪器的使用方法以及电泳技术的基本操作、标准曲线的制作，找出水稻种子的耐盐程度和最适发育环境，探讨了NaCl溶液浸种对水稻种子萌发过程若干生化指标的影响。结果：表明NaCl溶液浸种对水稻种子萌发过程若干生化指标的影响与NaCl溶液的浓度有关。在1~60mmol/L的NaCl溶液浸种能提高水稻种子的活力及淀粉酶、过氧化物酶、脂肪酶的活力，提高游离蛋白质的含量和降低游离氨基酸的含量，并且能促进水稻幼苗茎、叶和根系的生长。当浓度超过1~600mmol/L时，浸种会降低水稻种子的活力及淀粉酶、过氧化物酶、脂肪酶的活力，降低蛋白质的含量和提高游离氨基酸的含量，并且水稻种子的萌发及幼苗的生长受到抑制。结论：低浓度的NaCl溶液比高浓度的NaCl溶液的促进效果更好。 关键词：生化指标、高低盐水处理、水稻种子 1.前言： 随着人口的增长和经济的发展，人类对农产品的需求量逐渐增大，由于土地的局限性，所以如何提高农作物的生长及生产的研究程度进一步加大。特别对于中国这个既是人口大国又是农业大国的国家来说，如何提高水稻的萌发及生长和生产的研究是非常重要的。本文研究了研究了高低浓度浸种处理对水稻种子萌发的剂量效应，选择最佳浓度和界定临界浓度，为提高水稻的高产和耐盐育种及栽培提供试验数据。 2.材料与方法： 2.1材料：同品种的60mmol/L的NaCl溶液和600mmol/LNaCl溶液浸泡的新鲜水稻种子。 2.2方法：①游离氨基酸总量测定②可溶性蛋白质含量的测定③淀粉酶活性的测定④过氧化物酶同工酶测定 2.2.1提取：准确称取分别在60mmol/L的NaCl溶液和600mmol/LNaCl溶液浸泡的新鲜水稻种子1.0g，置于研钵中，加入2ml蒸馏水和少量石英砂充分研磨成匀浆。将匀浆倒入离心管中，，并且用蒸馏水洗涤残渣至离心管中。然后放在3000r\min离心10min,将上清液倒入100ml容量瓶中，加蒸馏水定容至刻度，摇匀。 2.2.2检测：①取样品滤液1.0ml,放入20ml试管中，加入蒸馏水1.0ml加入0.5ml乙酸- 氯酸盐缓冲液和3.0ml水和茚三酮，根据吸光度在曲线上查得用回归方程计算 ②吸取上清液1.0ml于试管中（另取一只试管加入1.0ml蒸馏水作为空白），按照标准曲线制作的步骤加入试剂显色并测定其吸光度。 ③取10样品稀释极为淀粉酶稀释液，按照步骤加入试剂和反应后得到酶液，在540nm波长下比色，记录结果。 ④制作胶体、点样、电泳 、剥胶染色、绘制酶谱条带。 2.2.3计算：①检测公式：氨基酸含量=(C*Vt*100)/(Vs*W) C——标准曲线上查得的氨基酸含量 Vt|——；样品总体积 Vs——测定时取用的体积 W——样品质量 ②蛋白质含量=（C*Vt*N）/（Vs*W*1000）C——样品的吸光度所查得的标准曲线值 V——提取液总体积N——稀释倍数Vs——测定时所用体积 W——样品质量 ③α-淀粉酶活性=（X*Vt*N）/（W*Vs*t）（α+β）-淀粉酶活性=（X*Vt*N）/（W*Vs*t）X——从表上查得的麦芽糖含量Vt——淀粉酶原液总体积 Vs——测定时取用的酶液体积 W——样品质量 t——反应时间 N——稀释倍数 ④迁移率Rf=a/b a——同工酶迁移距离b——溴酚蓝迁移距离 3.结果与分析： 3.1结果：游离氨基酸总量测定的实验结果游离氨基酸总量高盐清水低盐；可溶性蛋白质含量的测定实验中蛋白质含量低盐清水高盐；淀