细菌自动鉴定及药敏系统及研究进展.docVIP

细菌自动鉴定及药敏系统的研究进展 发布时间06年01月17日 15时36分 　 　　陶庆春 安鹏 陈小丹 　　细菌的鉴定是细菌分类的实验过程。长期以来，临床微生物实验室一直沿用100多年前由Gram、Pasteur、Koch、Petri等创造的传统的微生物学鉴定方法，这些传统的鉴定方法不仅过程烦琐，费时费力，且在方法学和结果的判定、解释等方面易发生主观片面而引起的错误，难以进行质量控制。　　20世纪60年代以后，微生物学家和工程技术人员密切合作，对微生物的研究采用了物理的、化学的分析方法，发明了许多自动化仪器，并根据细菌不同的生物学性状和代谢产物的差异，逐步发展了微量快速培养基和微量生化反应系统，使原来缓慢、烦琐的手工操作变得快速、简单，并实现了自动化和机械化。微生物鉴定自动化方法，包括（1）临床微生物鉴定系统；（2）气液色谱分析；多用于研究；（4）化学发光技术；可鉴定一些细菌少数分枝杆菌属和一些真菌。80到90年代发展迅速，并广泛用于临床。1985年第一台自动化细菌分析化仪器Vitek-AMS进入中国并成功使用。1999年底法国梅里埃公司推出VITEK2系统，从接种物稀释、密度计比较及卡冲填和封卡等步骤均实现了全自动化。目前已有多种微生物自动鉴定及药敏测试系统问世，如VITEK-Au-toMicrobicSystem（AMS）、PHOENIXTM、MicroScan、Sensi-titre、ABBott（MA-2 System）、AUTOBACIDXSys-tern等。这些自动化系统具有先进和微机系统，广泛的鉴定功能，适用于临床微生物实验室。卫生防疫和商标标系统，主要功能包括细菌鉴定、细菌药物敏感性试验及最低抑菌浓度（MIC）的测定等。其准确性和可靠性均已大大提高。 需要生长 分析 阳性结果显示 系统例子 PH基础反应（多为15-24小时） 是 碳源利用 PH指示剂颜色变化；利用碳源源产生酸，利用氮源产碱 API CrystaIV ITEK MicroScan 酶谱（多为2-4小时） 否 微生物已有的酶 当无色复合物被适当酶水解时，色源/荧光源释放引起颜色变化 Microscan IDS （Remel） 碳源利用 是 有机产物 因转移电子至无色四唑氮标记碳源使染料变为紫色 Biolog 挥发的或非挥发的酸检测 是 细胞脂肪酸 以检测代谢产物以基础的层析技术，与数据库中的数据相比较 MIDL 生长可见检测 是 不同底物 微生物利用某一底物产生浊度 酵母样菌 　　2用上述原理的各种鉴定系统可鉴定肠杆菌科，非发酵菌，革兰阳性球菌，革兰阴性球菌，厌氧菌和酵母菌。目前较完善的鉴定系统性能比较。　　　　　　　　　　　　　自动鉴定系统性能比较 Vitek AutoSCAN-4 Walk/Away Senititre 无限 60 polor 系统内容 32/60/120 无限 40/96 92 无限 数据库中可鉴定菌种数 566 480 需氧革兰阴性杆菌（NG） 116 112 139 147 246 240 78 需氧革兰阳性球菌 50 49 49 否 否 815 否 厌氧菌 否 58 54 否 否 50 否 苛氧菌 否 21 20 否 194 否 酵母菌 36 40 42 否GN中孵育 否 28 否 分枝杆菌 否 否 否 否 手工 自动 否 接种 自动 手工 手工 自动 分开 联机 自动 孵育 联机 分开 联机 联机 4或16h 30min 分开 需氧革兰阴性杆菌 2-18h 24或48h 2或15-42h 5或18h 4或16h 30min 18-24h 需氧革兰阳性球菌 2-15h 24或48h 2或15-42h 30min 厌氧菌 否 4h 4h 30min 酵母菌 24或48h 4h 30min 分枝杆菌 否 否 否 否 手工加试剂 否 是 否 室温 4 室温 是 贮存温度（℃） 4 室温，4 室温，4 室温 其它性能 是 否 否 药敏试验 是 是 是 否 否 否 是 尿筛检/鉴定 是 否 否 是 是 是 是 DMS 是 是 是 是 计算机接口 是 是 是 Biology MIS Autosce 　　三、常见细菌自动鉴定及药敏系统工作原理　　（一）半自动微生物鉴定和药敏系统　　1．VITEK-ATB　　ATB鉴定系统是将肉眼观察的结果输入计算机，计算机数据库由许多细菌条目（taxa）组成，将输入结果与数据库内细菌条目比较，自动地得到鉴定结果，ATB敏感性试验采用半固体琼脂培养基，不同的药敏试条含有不同种类的抗生素，每种抗生素都设有两个关键性的浓度，在24小时内通过观察有（+）无（-）细菌生长以判断药敏试验结果。结果可直接判读为：敏感，中介或耐药。由读数仪和计算机两部分组成，系统是由API金标准改良而成，