核酸的酶促降解和核苷酸代谢分析报告.pptx

核酸的酶促降解和核苷酸代谢 第三部分：生物大分子前体的合成 1 核酸的酶促降解 2 核苷酸的分解代谢 3 核苷酸的生物合成 基本要求： （1）掌握常见核酸酶、核苷酸的合成代谢 （2）理解核苷酸的合成的补救途径 （3）了解核苷酸的分解代谢 教学重点及难点： （1）限制性内切酶 （2）核苷酸的合成代谢 核酸的酶促降解和核苷酸代谢 核苷 核酸酶 核苷酸酶 核苷酶 嘌呤分解 嘧啶分解 核酸 核苷酸 戊糖 碱基 磷酸 核酸的酶促降解和核苷酸代谢 1 核酸的酶促降解 生物体内存在多种降解核酸酶类，统称为核酸酶(nuclease) ,在核酸降解和周转中起着重要作用。 核酸的酶促降解和核苷酸代谢 外切酶作用于核酸链一端，逐个水解下核苷酸，是非特异性磷酸二酯酶。 蛇毒磷酸二酯酶从DNA或RNA的游离3-羟基端开始，逐个水解下5-核苷酸； 牛脾磷酸二酯酶从游离 5-羟基端开始，逐个水解下3-核苷酸。 1.1 核酸酶—核酸外切酶 核酸的酶促降解和核苷酸代谢 内切酶特异地水解多核苷酸内部各键，是特异性强的磷酸二酯酶。牛胰核酸酶作用于嘧啶核苷酸磷酸二酯键，生成嘧啶核苷-3-磷酸或末 端为嘧啶核苷-3-磷酸的寡核苷酸。牛胰核酸酶专一作用于RNA，对DNA及其它磷酸二酯化合物不作用或作用活性很低。 1.1 核酸酶—核酸内切酶 核酸的酶促降解和核苷酸代谢 1957年在曲霉(Aspergillus)中分离提纯出RNaseT1，由105个AA组成。专一水解鸟苷酸二酯键，产生 3-GMP或以3-GMP为末端的寡核苷酸。 1.1 核酸酶—核酸外切酶 核酸的酶促降解和核苷酸代谢 1.2脱氧核糖核酸酶 脱氧核糖核酸酶(DNase)：专一水解DNA。 内切酶：切断双链或单链。 外切酶：有5→3切割或3→5切割。 尚未发现有碱基专一性DNase，但有序列专一性，即限制性内切酶(restriction endonuclease)。 核酸的酶促降解和核苷酸代谢 1.3 限制性内切酶(restriction endonuclease) 限制性内切酶，restriction enzyme，在某些细菌细胞内存在的一类能识别一定序列并水解外源dsDNA的核酸内切酶，并形成粘性末端（sticky ends）或平齐末端（“blunt ends） 。 核酸的酶促降解和核苷酸代谢 核酸的酶促降解和核苷酸代谢 核酸的酶促降解和核苷酸代谢 限制性内切酶命名 EcoRI： 第1个大写E：大肠杆菌属名(Escherichia)第1个字母； 第2,3小写co：种名(coli)的头两个字母； 第4个大写R： 所用大肠杆菌的菌株； 第5个罗马字：从该细菌中分离出来这一类酶的编号。 核酸的酶促降解和核苷酸代谢 核酸的酶促降解和核苷酸代谢 核酸的酶促降解和核苷酸代谢 2 核苷酸的分解代谢 核苷酸经核苷酸酶(nucleotidase)催化，水解为核苷及无机磷酸。 非特异性的核苷酸酶，能作用于一切核苷酸。 特异性强的核苷酸酶只能水解3-核苷酸或5-核苷酸，分 别称为3-核苷酸酶或5-核苷酸酶。 核酸的酶促降解和核苷酸代谢 核苷经核苷酶(nudeosidase) 分解为嘌呤或嘧啶和戊糖。 核苷水解酶(nucleoside hydrolase) 核苷磷酸化酶(nucleoside phosphorylase) 2.1 核苷酸的水解 核酸的酶促降解和核苷酸代谢 2.2 嘌呤的降解 腺嘌呤和鸟嘌呤经脱氨氧化转变为黄嘌呤再进行降解。 核酸的酶促降解和核苷酸代谢 xanthine oxidase 核酸的酶促降解和核苷酸代谢 嘌呤代谢与痛风（gout） 黄嘌呤氧化酶（Xanthine oxidase） 核酸的酶促降解和核苷酸代谢 次黄嘌呤 别嘌呤醇 奥昔嘌醇 核酸的酶促降解和核苷酸代谢 2.3 嘧啶的降解 嘧啶分解时有氨基的首先水解脱氨基。 胞嘧啶首先水解脱氨基，转化为尿嘧啶。 尿嘧啶和胸腺嘧啶经还原打破环内双键，水解开环成链状化合物，再水解成CO2, NH3, -丙氨酸，-氨基异丁酸， -氨基异丁酸脱氨基后进入有机酸代谢或直接排出体外。 核酸的酶促降解和核苷酸代谢 3 核苷酸的生物合成 利用核酸降解或进食等从外界补充的 含氮碱基或核苷合成新的核苷酸。 从头合成(de novo synthesis) 利用氨基酸、磷酸戊糖、CO2和NH3等简单的化合物合成核苷酸。 救补途径(salvage pathway) 合成途径 核酸的酶促降解和核苷酸代谢 核苷酸的生物合成与癌症治疗 北宋（ 1170年）东轩居士著《卫济宝书》：“痈疽五发，一曰癌……”。 核酸的酶促降解和核苷酸代谢 核酸的酶促降解