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第六真核生物的遗传分析精要.ppt

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(2)位点专一性重组 这类重组依赖于小范围的同源序列联会;重组事件只涉及特定位置的短同源序列,或仅涉及特定的碱基序列。 重组时发生精确的切割和连接反应,DNA不丢失、不合成。 重组发生在特殊位点上,此位点含有短同源序列,有位点专一性的蛋白因子催化。 两个DNA分子并不交换对等的序列部分,而往往是一个DNA分子整合到另一DNA分子中。因此这种重组又叫做整合式重组(Integrative Recombination). ?噬菌体的整合是一个典型实例。 (3)异常重组 异常重组(Illegitimate Recombination)完全不依赖于重组序列之间的同源性,重组时一段序列插入到另一序列中。 形成重组分子时往往依赖于DNA复制来完成重组过程。因此也叫做复制性重组(Replicative Recombination)。 转座子的转座是一个典型实例。转座作用不依赖转座子DNA序列与被插入序列DNA的同源性,也不需要RecA蛋白因子。 转座依赖于转座区的DNA复制和与转座有关的酶来完成重组。 实物照片 模式图 环状DNA分子的重组 两环状DNA在同源区配对、断裂、重接形成8字型中间体;中间体切开有3种可能方式:1). 沿2、4方向切开产生两个亲本环,各含一段杂合DNA链;2). 沿1、3方向切开产生由两亲本环首尾共价连接的单体环。在任一同源区重组产生两个重组DNA;3). 沿1和2或3和4切开产生滚环结构。单体环是环状DNA重组的必然过渡结构。 双链断裂修复模型—真菌中的一种同源重组机制 实例:单转换与共转换中的子囊菌类型 因此,如果发现两个染色体臂上的基因同时出现纯合化现象,就有可能是一条染色体丢失的结果。对于一个未知属于哪一个连锁群的基因而言,如果它是随着某条染色体两个染色体臂上的基因的纯合而呈现纯合化现象,那么就可初步判断该基因属于这一连锁群。 真菌在二倍体的有丝分裂过程中,偶尔发生同源染色体交换,导致连锁基因的重组,这一遗传变异过程称为准性生殖(parasexuality)。 准性生殖产生的重组体细胞一般和营养体细胞没有形态、生理上的差异,而且不产生在特殊的囊器中。 准性生殖过程中染色体交换和染色体的减少是不规律且不协调的,这便是准性生殖过程与有性生殖过程中基因重组的主要区别。 染色体上面是有丝分裂数据,下面是减数分裂定位数据,两者定位数据相差甚远,这正是有丝分裂与减数分裂交换过程的基本差别,但二者在顺序上是一致的。 以构巢曲霉中一个具有y、ad、pab和pro以及它们的显性等位基因的杂合二倍体为例来说明。先检出二倍体黄色分生孢子( y+ / y- ),随后按它们所产生的表型来确定分离子的基因型。在y的这些隐性纯合子中有5.5%为pab和pro的纯合子,72%是pab纯合子,22.5%为原养型。由于没有一个y分离子是需腺苷酸的,所以可推断ad位于染色体的另一臂上。染色体一个臂上的有丝分裂交换对于其另一臂上等位基因的分离无效,而在一条染色体的两臂同时发生有丝分裂交换的情况又极其罕见。通过有丝分裂定位得到的构巢曲霉的第一染色体右臂的各基因之间的图距如下: 第六节 体细胞融合与基因定位 6.1 细胞融合与基因定位 细胞融合(cell fusion):两个或几个体细胞融合成为一个细胞的过程。 是体细胞遗传学的核心内容;是应用体细胞遗传学技术进行基因定位的基础。 (1)体细胞的性质与细胞培养 体细胞系(somatic cell line):从有性生殖的高等真核生物取其细胞进行离体培养,得到的培养物。 用来培养的体细胞有两种类型: 一种是直接从动、植物正常组织中取得的细胞,染色体结构不变,细胞生活一个有限的时期,例:外周血淋巴细胞、皮肤成纤维细胞等。(50代) 另一类是永久细胞系:可在体外无限制地培养。非整倍体、异常染色体。例:癌细胞、转化细胞等。 细胞培养:模拟细胞在体内的生活条件,人为地提供一切必要的营养成分,保持一定的温度、酸碱度、渗透压并避免微生物的侵染等,使细胞在体外生长、发育、繁殖、传代,这就是细胞培养。 细胞克隆(cell clone):由一个细胞通过有丝分裂无性繁殖出来的一群细胞或建立的细胞系,它们在遗传上和表型上一致。 体细胞?? 突变细胞,表型有遗传突变的细胞(或直接从遗传病患者身上取得或直接从突变植株上取得)。

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