载体的介绍和载体的导入.docVIP

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  • 2016-07-04 发布于安徽
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载体的介绍和载体的导入.doc

載體的介紹及載體的導入 什麼是載體? 載體(vector)? 用於基因轉殖的轉移感染技術,是一種可攜帶DNA、RNA或蛋白質片段進入宿主細胞進行複製的媒介物質。 根據作用可區分為: (1)使用來選殖、重組、複製或保存DNA片段之載體稱為選殖載體(cloning vector)。 (2)作為表現基因或製造蛋白質之載體稱為表現載體(expression vector)。 載體的條件? 容易製備、能存活於宿主細胞裡並大量複製。沒有強烈的副作用,不會引起腫瘤的產生。有多個限制?切點與標記基因,可以準確地傳送基因到指定的專一性標的細胞、準確地插在特定的染色體位置。? 載體種類大致上有三大類,? 一、細菌的質體(plasmid)。(一種獨立於染色體之外自行複製的環狀遺傳單位) 二、病毒與噬菌體。? 根據基因轉殖的目標生物體不同,會影響所要利用的載體種類,對於動物時使用的則是利用動物病毒中的反轉錄病毒或腺病毒感染宿主細胞(前者只在持續分裂中細胞反應且可能嵌錯位子,後者則較不穩定),在植物時則使用能感染植物的農桿菌與含有T-DNA質體(外源基因載體)的大腸桿菌一起培養,將基因片段導入農桿菌,在以農桿菌的Ti質體為媒介導入植物細胞。 一般來說,天然的載體常不太符合條件,所以常因需要人工改造載體,且現今有人工的細菌染色體載體。 三、非病毒載體 如病毒載體般,能將基因片段轉入細胞內的轉染方法: 1、脂小

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