* 第二章 分析化学中的分离技术 第五节 膜分离技术与生物试样分离 一、透析 —超滤分离技术 二、超滤 三、生物大分子的色谱分离法 * 一、透析 ——超滤分离技术 原理:透析是采用半透膜作为滤膜,使试样中的小分子经扩散作用不断透出膜外,而大分子不能透过被保留,直到膜两边达到平衡。 特点:半透膜两边均为液体,一边为试样溶液,另一边为纯净溶剂(水或缓冲溶液)。可不断更换外层溶剂使扩散不断进行,直至符合要求。 应用:制备或提纯生物大分子时,除去小分子物质及其杂质,脱盐。 用于透析的半透膜应具备的条件: (1)在溶剂中能膨胀形成分子筛状多孔薄膜,只允许小分子溶质通过,而阻止大分子(如蛋白质)通过; (2)化学惰性; (3)在水、盐溶液、稀酸或稀碱溶液中稳定; (4)有一定的机械强度和良好的再生性能。 * 透析的装置与方法 半透膜可制成管状,按需要截取一定长度,将一端封闭后,装入需要透析的试样溶液后,放入盛有溶剂的透析缸中。 商品透析管常涂有甘油以防干裂,也可能含有其他微量杂质。 预处理:用50%乙醇慢慢煮沸一小时,再分别用50%乙醇、0.01mol/L碳酸氢纳溶液、0.001 mol/L EDTA 溶液依次洗涤,最后用蒸馏水洗涤三次; 透析过程注意点: (1)透析前,对装有试液
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