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沉淀分离法及应用 等电点（isoelectric point） 定义：两性离子所带电荷因溶液的pH值不同而改变，当两性离子正负电荷数值相等时，溶液的pH值即其等电点。 牛奶中提取酪蛋白 牛奶中主要的蛋白质是酪蛋白，含量约为35g/L 酪蛋白是一些含磷蛋白质的混合物，等电点为4.7 利用等电点时溶解度最低的原理，将牛乳的pH调至4.7时，酪蛋白就沉淀出来 用乙醇洗涤沉淀物，除去脂类杂质后便可得到纯的酪蛋白 有机溶剂沉淀法 同盐析一样，随着沉淀剂——有机溶机浓度的上升，蛋白质溶解度也呈指数规律下降。 式中, So为当（K/e2）? 0时S的外推值；e为水-有机溶剂混合物的介电常数；K为常数(水的介电常数的吸收系数)。 有机溶剂沉淀法 有机溶剂的种类： 丙酮(首选)、乙醇、甲醇和乙腈，常用于低盐浓度下沉淀pro。 机理： A、有机溶剂沉淀法的机理是加入溶剂后，会使水溶液的介电常数降低，而使pro分子间的静电引力（库仑力）增大，导致凝集和沉淀。 B、有机溶剂使pro溶剂化，使原来与pro结合的水被溶剂所取代，从而降低了pro溶解度。这种理论不能说明为什么乙醇比丙酮的亲水性强，丙酮却比乙醇沉淀pro的能力强，也解释不了丙酮、乙醇之类溶剂在所谓脱去pro水膜的过程中容易造成pro变性，而盐析脱水时不造成pro变性。 C、丙酮、乙醇等不仅是pro的沉淀淀剂