第二节 血液常用检查 方紫静 11号 概述: 血液不断地流动与全身各个组织器官密切联系,参与机体各项生理活动,维持机体正常新陈代谢。在病理情况下,除造血系统疾病外,全身其他系统和组织发生病变也可直接或间接引起血液成分的变化。本节所述内容主要是对红细胞、白细胞及血小板数量和形态变化的检验,是临床上最为常用和较重要的检验项目之一。 基本内容 一、红细胞计数 二、血红蛋白测定 三、红细胞形态检查 四、白细胞计数 五、白细胞分类计数 六、白细胞形态检查 七、血小板计数 八、血小板形态检查 一、红细胞计数(RBC) 一、红细胞基础理论 (一)RBC来源、生成、寿命及衰亡 红细胞系祖细胞 早幼、中幼和 (BFU-E和FU-E) 晚幼各发育阶段 骨髓造血干细胞 骨髓原红细胞 (CFU-S) 促红细胞生成素 3~5次分裂 (Erythropoietion,EPO) 网织红细胞 成熟红细胞 从骨髓益出至外周血的全过程约需5天时间 一个原红细胞最终可生成8~16个成熟红细胞 红细胞的生存时间为120天 珠蛋白 参与再造血 衰亡的RBC 铁 胆红素 , 参与胆红素代谢 (二)红细胞的功能 红细胞是血液中数量最多的有形成分,有交换和携带氧和二氧化碳的功能,主要通过胞内血红蛋白完成。 (三)红细胞计数(RBC) 【概念】 即测定单位体积外周血液中红细胞的数量,是诊断贫血等疾病最常用的检查项目之一。 1.显微镜计数法 (一)原理:用等渗稀释液将血液稀释一定倍数 后,滴入改良Neubauer计数板,再显微镜下计数一定范围内的红细胞数,经换算即可求得每升血液中的红细胞数。 (二)器材 a.显微镜 b.微量吸管 c.改良Neubauer计数板 d.盖玻片 (三)试剂 ?.赫姆氏(Hayem)红细胞稀释液 氯化钠 1.0g(调节渗透压) 结晶硫酸钠 5.0g(提高比密,防止红细胞粘连。) 氯化高汞 0.5g(防腐剂) 蒸馏水 加至200ml ?.枸橼酸钠稀释液(应用广泛) 氯化钠 (调节渗透压) 枸橼酸钠 (调节渗透压及抗凝作用) 甲醛 (防腐剂) 蒸馏水 ?.普通生理盐水加1%甲醛的生理盐水 (四)操作方法 1.小试管加RBC稀释液2ml。 2.采血,取血10ul。 3.擦去管外的血,轻吹入试管底部, 再漱洗吸管2~3次,立即混匀。 4.混匀后充入计数室,静置3~5 min, 高倍镜下计数。 *.中央大方格四角+正中 5个中方格为红细胞的计数区域 改良牛鲍氏计数板 1.各池刻划有9mm2面积的刻度,分为 9个大方格,每格长、宽各1mm,面积1mm2,体积为 0.1mm3,容量 0.1μl。 2.四个角的大方格都用单线划分为16个中方格,为计数密度小的(白)细胞用。 容量: 0.1μl/大方格 3.中央的一个大方格,用双线划分为25个中方格,每个中方格又被单线划分为16个小方格,共有400个小方格,供计数密度大的(红)细胞用。 容量: 0.1μl/大方格 0.004μl/中方格 计数池 压线计数原则(数上不数下,数左不数右,左上外线,右下内线) 手工显微镜红细胞计数(RBC) 5.计算 6.报告方式 RBC= ×1012/L 注意事项 1. 将红细胞稀释液充入计数池时要一次完成,不能产生满溢、气泡或充池不足的现象。 2. 红细胞在计数池中若分布不均,每个中方格之间相差超过20个以上时要重新充池计数。正常数值范围内,2次红细胞计数相差不得超过5%。 3.红细胞数量较多,在
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