Calibrite微球演示双参数获取和分析.docVIP

Calibrite微球演示双色样本的获取和分析 ㈠ 样本制备（2管）： ① 1ml鞘液（未标记微球一滴）；――演示同型对照样本 ② 1ml鞘液（未标记、FITC微球各一滴）；――演示FITC单染补偿管； ③ 1ml鞘液（未标记、PE微球各一滴）；――演示PE单染补偿管； ④ 将②③中的样本各取200微升混合，演示双染样本。 ㈡ 流式上机检测： 1、在“浏览框（browser）”中建文件夹，实验组，样本和采集管并重命名（选中后，点右键重命名）。 2、将“浏览框”的采集箭头选中采集管，点击“仪器框（instrument）”的参数parameter页面，删除不必要的荧光参数，仅保留FITC和PE，散射光参数选择线性，荧光参数选择对数，所有参数均选择A面积信号。 3、在“通用工作页面（Global sheet）”上建获取模板： 画2个散点图。 ① 第一个图，横轴FSC-A，纵轴SSC-A，圈定单个微球的矩形门P1； ② 第二个图，横轴FITC-A，纵轴PE-A，选中该图后： 单击右键，在“Show Population”下选中P1，即仅显示P1门内的颗粒。 单击右键，选择“Show Population Hierarchy”。 单击右键，选择“Creat Statistics View”生成统计框，右键单击统计图，选择“Edit Statistics View”，选择相应荧光参数的mea