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基因工程原理与应用 任课老师:高燕会 主要内容 第一章:绪论部分 第二章:基因工程的基本操作程序 第三章:基因工程的工具酶 第四章:核酸操作的基本技术 第五章:基因工程的载体 第六章:基因文库 第七章: 外源基因表达 主要内容 第八章:聚合酶链式反应(PCR) 第九章:分子标记及芯片技术 第十章:微生物的基因工程 第十一章:植物基因工程 第十二章:动物基因工程 第十三章:基因工程规则、专利及安全性 基本要求 掌握基因克隆的基本工具。特别是不同的载体。 克隆基因的基本方法。 怎样利用基因重组技术研究基因的结构、表达和调控。 利用基因工程生产重组蛋白,基因工程在医药和农业上的应用。 能够设计一个基因克隆的程序。 PCR技术基本原理和应用 参 考 书 Gene cloning, T.A. Brown. Third edition. 基因工程原理,吴乃虎编著,科学出版社 基因工程概论,张惠展编著,华东理工大学出版社。 植物基因工程原理与技术,王关林,方宏筠主编,科学出版社。 分子克隆实验指南,J. Sambtook, EF Frish, T Maniatis, 金冬雁,黎孟枫等译,科学出版社。 Chapter I 绪论 基因工程的概念 基因工程的发展史 基因工程的研究内容 基因工程的应用 一、生物工程等概念 生物工程:直接或间接利用生物体的机能生产物质的技术。包括发酵技术、基因重组、细胞融合、细胞大量培养、生物反应器等技术。 生物技术:是在细胞水平上,特别是在分子水平上对生物体遗传性实现接近定向改造的一套内容繁多和复杂的技术。包括基因工程、细胞工程、酶工程、发酵工程等。 一、生物工程等概念 遗传工程:人工改造生物体遗传性的技术。包括细胞工程、染色体工程、细胞器工程、基因工程等 。 生物技术的范围最广。 一、生物工程等概念 基因工程(又称分子克隆或基因的无性繁殖) 按照预先设计好的方案,利用现代分子生物学技术,特别是酶学技术,对遗传物质DNA直接进行体外重组操作与改造,将一种生物(供体)的基因转移到另外一种生物(受体)中去,从而实现受体生物的定向改造与改良。 即:通过体外基因操作,引起生物体性状改变的技术 广义基因工程:DNA重组技术的产业化设计与应用。 上游技术:外源基因重组、克隆和表达的设计与构建(重组DNA技术,即狭义基因工程) 下游技术:含有外源基因的生物细胞(基因工程菌或细胞)的大规模培养以及外源基因的表达、分离、纯化过程。 基因工程产生的理论依据 (1)DNA是遗传物质 (2)DNA双螺旋结构 (3)中心法则和遗传密码 (4)基因是可切割的 (5)基因是可以转移的 (6)多肽与基因之间存在对应关系 (7)基因可以通过复制传递遗传信息 二、基因工程的发展历史 1860至1870年 奥地利学者孟德尔根据豌豆杂交实验提出遗传因子概念,并总结出孟德尔遗传定律。 1909年 丹麦植物学家和遗传学家约翰逊首次提出“基因”这一名词,用以表达孟德尔的遗传因子概念。 1944年 3位美国科学家分离出细菌的DNA(脱氧核糖核酸),并发现DNA是携带生命遗传物质的分子。 1953年 美国人沃森和英国人克里克通过实验提出了DNA分子的双螺旋模型。 1969年 科学家成功分离出第一个基因。 1980年 科学家首次培育出世界第一个转基因动物转基因小鼠。 1983年 科学家首次培育出世界第一个转基因植物转基因烟草。 1988年 K.Mullis发明了PCR技术。 1990年10月 被誉为生命科学“阿波罗登月计划”的国际人类基因组计划启动 1998年 一批科学家在美国罗克威尔组建塞莱拉遗传公司,与国际人类基因组计划展开竞争。 1998年12月 一种小线虫完整基因组序列的测定工作宣告完成,这是科学家第一次绘出多细胞动物的基因组图谱。 二、基因工程的发展历史 1999年9月 中国获准加入人类基因组计划,负责测定人类基因组全部序列的1%。中国是继美、英、日、德、法之后第6个国际人类基因组计划参与国,也是参与这一计划的惟一发展中国家。 1999年12月1日 国际人类基因组计划联合研究小组宣布,完整破译出人体第22对染色体的遗传密码,这是人类首次成功地完成人体染色体完整基因序列的测定。 2000年4月6日 美国塞莱拉公司宣布破译出一名实验者的完整遗传密码,但遭到不少科学家的质疑。 2000年4月底 中国科学家按照国际人类基因组计划的部署,完成了1%人类基因组的工作框架图。 2000年5月8日 德、日等国科学家宣布,已基本完成了人体第21对染色体的测序工作。 2000年6月26日 科学家公布人类基因组工作草图,标志着人类在解读自身“生命之书”的路上迈出了重要一步。 二、基因工程的发展
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