氨基酸和蛋白质分析报告.pptVIP

奇妙无穷的 生命有机化学世界 第14章 氨基酸、多肽和蛋白质 氨基酸(amino acid)：结构、分类、命名和性质（两性电离和等电点、脱羧反应、与亚硝酸发应、显色反应、紫外吸收）。 肽的结构和命名 蛋白质的分类、结构和性质 第一节 氨基酸 一、氨基酸的结构、分类和命名 自然界已经发现的氨基酸达几百种 蛋白质水解后得到的编码氨基酸约20种 氨基酸种类：编码氨基酸、修饰氨基酸、非蛋白质氨基酸等。 氨基酸的主要官能团为氨基和羧基，且在固态和生理PH下多以离子形式存在，为偶极离子，即内盐。 构成蛋白质的编码氨基酸 均为?-氨基酸，除甘氨酸和脯氨酸外，其他均具有如下结构通式。 除甘氨酸外，其他氨基酸的?-碳原子均为手性碳原子，因此氨基酸具有旋光性，比旋光度是氨基酸的重要物理常数之一，是鉴别各种氨基酸的重要依据。 氨基酸构型标记可用D/L法或R/S法。 生物体内的旋光性氨基酸均为L-构型。 编码氨基酸的种类和命名 组成蛋白质的氨基酸目前发现至少有20种。每个氨基酸在合成蛋白质时都有各自的碱基序列和编码。 20种氨基酸分类如下： 脂肪族氨基酸（6种） 芳香族氨基酸（3种） 含硫氨基酸（2种） 含羟基氨基酸（2种） 碱性氨基酸（3种） 酸性氨基酸 （2种） 酰胺氨基酸（2种） 编码氨基酸的结构 编码氨基酸的结构 编码氨基酸的结构 编码氨基酸的结构 编码氨基酸的结构 编码氨基酸的结构 编码氨基酸的结构 编码氨基酸的结构 编码氨基酸的结构 编码氨基酸的结构 编码氨基酸的结构 编码氨基酸的结构 编码氨基酸的结构 编码氨基酸的结构 编码氨基酸的结构 编码氨基酸的结构 编码氨基酸的结构 编码氨基酸的结构 编码氨基酸的结构 编码氨基酸的结构 修饰氨基酸 在少数蛋白质中分离出一些无相应遗传编码，由编码氨基酸经过修饰得到的氨基酸，通常称为修饰氨基酸或衍生氨基酸。 其中重要的有4-羟基脯氨酸、5-羟基赖氨酸、N-甲基赖氨酸、和3,5-二碘酪氨酸等。 非蛋白氨基酸 在自然界蛋白质以外的环境中，还发现一些游离或结合状态的β－氨基酸、γ－氨基酸、δ－氨基酸和D－型氨基酸存在与生物体内。有些是重要的代谢前体和中间体。 二、氨基酸的性质 内盐，晶体，熔点较高（200℃以上，受热分解不熔融） 易溶于强酸、强碱，水中溶解度差别大 多有旋光活性，旋光度是鉴别各种氨基酸的重要依据 氨基酸的光吸收：在远紫外区(220nm)均有光吸收。在近紫外区(220-300nm)只有酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸有吸收光的能力。不同氨基酸有不同的最大吸收波长和吸收系数。如：酪氨酸的?max＝275nm，?275=1.4x103 二、氨基酸的化学性质 1、氨基酸的酸碱两性 氨基酸在结晶形态或在水溶液中，以两性离子形式存在(-NH3+ 、 -COO- )。氨基和羧基等酸碱基团的电离使氨基酸具有一定的酸碱性。可用酸碱滴定法测定Pka 值或含量。 2、氨基酸的等电点及其应用 氨基酸中的羧基和氨基的电离平衡受溶液酸碱度的影响，且方向相反。 当溶液浓度为某一pH值时，氨基酸分子中所含的-NH3+和-COO-数目正好相等，净电荷为零。这一pH值即为氨基酸的等电点，简称pI。在等电点时，氨基酸既不向正极也不向负极移动，即氨基酸处于两性离子状态。 pI＝（pKx ＋pKy）/2 pKx、pKy对应于相应的两个可解离基团 氨基酸的等电点与电离平衡移动 阳离子 偶极离子 阴离子 移向阴极 不移动 移向阳极 氨基酸的等电点的应用 各种氨基酸由于其组成和结构不同而具有不同的等电点。因此，等电点可以看作是氨基酸的物理常数 不同的氨基酸在同一PH值溶液中，所带的电荷种类和电量也都不同。因此，可据此采取电泳法对氨基酸进行分离和鉴定。 氨基酸的常用分离技术——离子交换层析 3、氨基酸的脱羧反应 具备羧基的基本性质： —成盐、成酯、生成酰卤、脱羧反应等 4、与甲醛发生羟甲基化反应 此反应用于氨基酸的甲醛滴定，计算氨基酸的电离常数 5、与亚硝酸反应 用途： 范斯来克（Van Slyke)法定量测定氨基酸的基本反应。 6、酰化反应 用途：用于保护氨基以及肽链的氨基端测定。 7、与羰基反应生成希弗碱 用途