高考生物二轮专题突破(名师点拨+预测演练)基因工程和细胞工程(含试题)精要.pptVIP

1.如图为细胞融合的简略过程，请据图回答相关问题： (1)若a、b分别表示白菜和甘蓝两种植物的体细胞，则采用化学法形成c时，一般是用 作为诱导剂。由d形成杂种植株的过程所依据的原理是 ，技术手段为 ，此技术包括两个关键环节： 和 。从本质上讲，“白菜—甘蓝”杂种植株具有的性状是 的结果。 (2)若a、b分别为骨髓瘤细胞和B淋巴细胞，假设仅考虑某两个细胞的融合，则可形成 种类型的细胞d，因此需用特定的选择培养基筛选出 细胞用于培养。选出此细胞后，还需进行 培养和 检测，经多次筛选，就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。 (2)②过程应采集处于 的卵母细胞，且去掉其细胞核，去核的目的是： 。 (3)③过程不同于植物细胞融合的诱导方法为 ，用 促使动物细胞发生融合。 (4)上述图示用到的生物工程技术有： 、 、 以及 等。 1.基因工程的原理 (1)基本工具 ①限制性核酸内切酶：识别双链DNA的某种特定核苷酸序列，并使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，形成平末端或黏性末端。 ②DNA连接酶：连接两个DNA片段的磷酸二酯键，不能连接RNA。包括E·coli DNA连接酶和T4DNA连接酶。 ③载体：将目的基因导入受体细胞，能在宿主细胞中稳定存在并复制，具有遗传标记基因，具有多个限制性核酸内切酶的酶切位点。常使用的载体有质粒、λ噬菌体的衍生物和动植物病毒等。 (2)基本操作步骤 ①目的基因的获取 a．从基因文库中获取。 b．利用PCR技术扩增。 c．用化学方法直接人工合成。 ②基因表达载体的构建 a．基因表达载体的组成：目的基因＋启动子＋终止子＋标记基因。 b．基因表达载体的构建方法 ③将目的基因导入受体细胞 ④目的基因的检测与鉴定 a．目的基因插入检测：DNA分子杂交技术。 b．目的基因转录检测：(核酸)分子杂交技术。 c．目的基因翻译检测：抗原—抗体杂交技术。 d．个体生物学水平检测：根据目的基因表达出的性状判断。 2．限制酶的切割序列具有包含关系：图2中BamHⅠ和MboⅠ识别的碱基序列和酶切位点分别是G↓GATCC、↓GATC，这两个限制酶都可切割同一碱基序列GGATCC。 3．切割时注意是否破坏所有抗性基因，导致缺乏标记基因。 【拓展延伸】　 限制酶、DNA连接酶、DNA聚合酶、解旋酶的比较 (2)过程②表示动物细胞培养，培养过程中出现接触抑制现象后，可以用胰蛋白酶处理，使之分散成单个细胞，随后分装到新的培养瓶中进行传代培养。 (3)判断目的基因是否在受体细胞中转录，可用分子杂交技术来检测，从细胞中提取mRNA和用放射性同位素或者荧光标记的目的基因单链DNA片段进行杂交。根据题中信息“肺细胞中的let－7基因表达减弱，癌基因RAS表达增强，会引发肺癌”可知，导入let－7基因后，肺癌细胞的增殖受到抑制； 据图2可知，let－7基因影响RAS基因表达的机理是：let－7基因转录产物miRNA与RAS基因转录产物RAS mRNA结合，使RAS基因翻译受到抑制，引起细胞中的RAS蛋白含量减少，进而导致癌细胞增殖受抑制。 【答案】　　(1)限制性核酸内切(或限制)　启动子 (2)胰蛋白　(3)RNA　RAS蛋白 1.动物细胞培养与植物组织培养的比较 【拓展延伸】　 生产单克隆抗体的三种方法 1．利用动物细胞融合技术形成的杂交瘤细胞生产单克隆抗体。 2．将目的基因导入浆细胞，利用基因工程生产单克隆抗体。 3．利用动物细胞核移植技术生产单克隆抗体。 据图回答下列问题： (1)过程①所需的酶是____________________ 。 (2)过程②后，在显微镜下观察融合的活细胞中有供体的________存在，这一特征可作为初步筛选杂种细胞的标志。 (3)原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压，其作用是______________________。原生质体经过________再生，进而分裂和脱分化形成愈伤组织。 (4)若分析再生植株的染色体变异类型，应剪取再生植株