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丰富的真菌世界 真菌培养技术 一、培养菌种 二、接种技术 三、存放方法 一、菌种的培养 1、制作马铃薯琼脂培养基 PDA培养基是人们对马铃薯葡萄糖琼脂培养基的简称，即Potato Dextrose Agar （Medium），依次对应马铃薯、葡萄糖、琼脂的英文。 配方： 　　马铃薯 300克、 葡萄糖 20克、 琼脂 15~20克、 自来水 1000毫升 操作方法：　 　　其做法是先洗净去皮,再称取300g马铃薯切成小块，加水煮烂（煮沸20~30分钟，能被玻璃棒戳破即可），用四层纱布过滤，再据实际实验需要加葡萄糖和琼脂，继续加热搅拌混匀，稍冷却后再补足水分至1000毫升，分装试管或者锥形瓶，加塞、包扎，（121℃）灭菌20分钟左右后取出试管摆斜面或者摇匀，冷却后贮存备用 高压蒸汽锅 培养箱 二、接种技术 1、斜面接种法 ?2、液体接种法 3、固体接种法 ?4、穿刺接种法 种袋栽培方式 1、栽培方式 （1）短木栽培 （2）枝束栽培 （3）室内床架式栽培法 （4）袋栽 2、熟料 将阔叶树林屑、棉子壳或粉碎了的杂木枝丫、农作物秸杆、废纸等4份加上麸皮、米糠等1份，石膏粉1%，糖1％和适量的水（65%左右）配成合成培养料装入玻璃瓶或塑料袋后进行蒸汽灭菌（高压1小时或常压8—10小时），接种培养。 三、存放方法 菇房消毒：菇房在使用前后必须进行严格消毒。消毒前一天，先将菇房内打扫干净，再用清水把室内喷湿，以提高消毒效果。菇房消毒通常在栽培前3天进行。消毒方法可根据具体条件选用如下的一种。 ①硫磺熏蒸：将菇房密封，然后按每立方米空间5克硫磺的用量点燃熏蒸。 ②每立方米空间用10毫升甲醛溶液1克高锰酸钾熏蒸。 ③用30%有效氯含量的漂白粉1公斤喷雾。 ④用5%石炭酸液喷雾。 消毒后开窗通风两天即可用于栽培。老菇房的消毒更要彻底。否则杂菌污染和虫害发生严重而导致生产失败。 * * 其他事项 　　1.培养基经灭菌后，必须放在37C温箱培养24h，无菌生长者方可使用。 　　2.PDA培养基一般不需要调pH。对于要调节pH的培养基，一般用pH试纸测定其pH。如果培养基偏酸或偏碱时，可用lmol/LNaOH或lmol/LHCL溶液进行调节。调节时应逐滴加入NaOH或HCl溶液，防止局部过酸或过碱破坏培养基成分。 　　3.培养基在使用时也可以做成不含琼脂的液体培养基，用于菌类的震荡培养。 　　4.培养基也可以加入氯霉素或土霉素，加入量为0.1g/L培养基，主要是为了抑制细菌的生长，减少干扰性