原癌基因抑癌基因研究进展技术方案.pptVIP

原癌基因与抑癌基因研究进展 导师：冯翠萍 学生：冯 嫣 主要内容： 原癌基因概述 抑癌基因概述 进 展 一、原癌基因 1、定义：调控细胞生长和增殖的正常细胞基 因。突变后转化成为致癌的癌基因。 原癌基因（proto-oncogene）是维持机体正常生命活动所必须的，在进化上高等保守。当原癌基因的结构或调控区发生变异，基因产物增多或活性增强时，使细胞过度增殖，从而形成肿瘤。 2、一些原癌基因的功能 3、原癌基因表达的特点： l、正常细胞中原癌基因的表达水平一般较低，而且是受生长调节的，其表达主要有三个特点： ①具有分化阶段特异性；②细胞类型特异性； ③细胞周期特异性。 2、肿瘤细胞中原癌基因的表达有2个比较普遍和突出的特点： ①一些原癌基因具有高水平的表达成过度表达。 ②原癌基因的表达程度和次序发生紊乱，不再具有细胞周期特异性。 3、细胞分化与原癌基因表达 。 在分化过程中，与分化有关的原癌基因表达增加，而与细胞增殖有关的原癌基因表达受抑制 4、原癌基因产物的生理功能 大多数原癌基因编码的蛋白质都是复杂的细胞信号转导网络中的成份，在信号转导途径中有着重要的作用． 原癌基因产物可作为： 1、生长因子，如sis(PDGF-β)，fgf家族(int-2，csf-1等)。 2、生长因子受体(质膜)：具酪氨酸蛋白激酶活性，如neu，ht，met，erbB，trk，fms，ros-1等。 3、非受体酪氨酸蛋白激酶(质膜／胞质)，如src家族：src，syn，fyn，abl，lck，ros，yes，fes，ret等。 4、丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶(胞质)：如raf，raf-1，mos，pim-1。 5、G蛋白(质膜内侧)，具GTP结合作用和GTP酶活性，如ras家族中的 H-ras，K-ras，N-ras，以及mel和ral等。 6、核内DNA结合蛋白(转录因子) 如myc家族，fos家族，Jun家族，ets家族，rel，erb A(类固醇激素受体) 二、抑癌基因 1、定义：抑癌基因也称为抗癌基因，编码对肿瘤形成起阻抑作用的蛋白质的基因。正常情况下负责控制细胞生长和增殖。是正常细胞中存在基因，当这些基因不能表达，或者当其产物失去活性时，可导致细胞癌变。如p53基因和成视网膜细胞瘤基因(Rb基因)。 2、已克隆鉴定的一些抑癌基因 由于抑癌基因为隐性基因，其分离鉴定的难度也相应较大，目前被鉴定的有10余种。有Rb、P53、WT1、NF1、DCC、APC、MCC、Krev-1、VHL、P16.其中以Rb、P53基因研究较为深入. 3、P53基因 人类癌症中，大约50％出现p53基因突变。p53基因含有11个外显子，编码含393个氨基酸组成的53 kD的蛋白质。 p53基因有野生型和突变型之分，野生型p53为抑癌基因，能抑制肿瘤发生；而突变型p53是致癌基因，可导致肿瘤发生。 Baker等将野生型P53 基因导入P53基因完全缺失的骨肉瘤细胞Saos-2,结果肿瘤细胞形态改变，细胞生长速度降低，裸鼠致瘤性消失. Roth等开展的直接瘤体注射携带野生型P53 基因的腺病毒（Adp53）治疗头颈部鳞癌患者的Ⅰ型临床研究的治疗结果表明：腺病毒成功地介导P53 基因在肿瘤原位转染，绝大多数肿瘤组织可持续表达P53 基因，瘤体内出现坏死和凋亡，患者对于该疗法完全耐受，并有一定的疗效。 4、Rb基因 Rb基因即成视网膜细胞瘤基因，是世界上第一个被克隆和完成全序列测定的抑癌基因。Rb基因表达产物为928个氨基酸组成的蛋白质。Rb蛋白分布于核内，是一类DNA结合蛋白。Rb蛋白的磷酸化／去磷酸化是其调节细胞生长分化的主要形式，在细胞周期的G。、G1期，它表现为去磷酸化，在S、M期则处于磷酸化状态。 Rb 蛋白的抑制作用主要是通过抑制一系列能够导致正常细胞发生恶性转化的癌基因转录来实现的。其中转录因子E2F是Rb/E2F通路中调控细胞有丝分裂的重要因子，是Rb 蛋白转录抑制作用重要的中间环节。E2F-l 在肿瘤发生过程中具有致癌和抑癌的双重作用，既能促进胃癌细胞增殖，也能促进膀胱癌细胞的凋亡。 Kwong等发现，在舌鳞癌中E2F-l高表达与高的总生存率及无瘤生存率相关。 Niwa等研究发现，4NQO 诱导鼠的舌癌模型研究中发现，与癌前病损相比舌癌中的Rb 蛋白表达明显下降。 5、抑癌基因的抗癌机制 抑癌基因的抗癌作用可能是控制细胞分化或生长，其机制