检疫09-冷藏和冰藏水产品的质量指标测定分析报告.pptVIP

一、挥发性盐基氮的测定 水蒸气蒸馏法 二、 三甲胺氮测定 1、原理 样品用三氯乙酸除蛋白后，在强碱性下，三甲胺被甲苯萃取甲苯经脱水后，与苦味酸作用生成黄色的苦味酸三甲胺盐，比色定量。 2、主要仪器与试剂 721型分光光度计； 甲苯(AR，用无水硫酸钠脱水) 40%三氯乙酸 2%苦味酸甲苯（2g苦味酸(经干燥器干燥)溶于100ml脱水甲苯） 0.02％苦味酸(将2%苦味酸甲苯用无水甲苯100倍稀释) 1+1碳酸钾溶液(100g碳酸钾加100m1水溶解) 10%甲醛溶液(取38%浓甲醛10m1，加28m1水) 三甲胺氮标准液(0.682g干燥器干燥的盐酸三甲胺，加1m1 1：3盐酸，加水定容100ml，再100倍稀释成1ml=10μg三甲胺氮，即TMA—N。一般要定氮，吸三甲胺贮存液5m1于微量定氮蒸馏器内，加约6ml10%氢氧化钠，然后按总氮测定操作，求出含氮量） 3、试样制备 取样品肌肉(去脂肪)，用绞肉机绞碎或切细，取20g加70ml水和10ml 40%三氯乙酸（除蛋白作用），用分散机均质，用中速滤纸过滤，滤液备检。 4、测定 吸滤液5ml(40μgTMA-N)，于25m1具塞试管中，加1ml 10%甲醛，10m1甲苯及3m1 1+1碳酸钾液，立即紧塞振荡1min，静置分层，吸取上层甲苯约8ml，于盛有0.5g以上无水硫酸钠的试管中，振荡脱水后，吸取5m1于试管中，加5ml 0.02%苦味酸甲苯混匀，于410nm下用1cm比色皿比色， 同时制备标准管，吸取三甲胺标准液(10μg／m1)0、0.5、1、2、3、4m1，加水补足5m1，以下同试样操作，制标准曲线。 5、计算 三、K值的测定 1、原理 ATP（三磷酸腺苷）→ADP（腺苷二磷酸）→AMP（腺苷酸）→IMP（肌苷酸）→HxR（次黄嘌呤核苷酸）→Hx（次黄嘌呤） 2、仪器与试剂 752C紫外可见分光光度计(上海第三分析仪器厂) ; 电动离心机( 上海手术器械厂) ;层析柱(自制) ; 717 强碱型阴离子交换树脂(16-50目) ATP、ADP、AMP、IMP、HxR、Hx标准品; 高氯酸(PCA) 、三氯乙酸(TCA) , 丙酮, 氢氧化钠, 氢氧化钾, 盐酸, 氨水, 氯化钠等皆为分析纯. 3、样品的制备 取鱼肉粉碎, 准确称取1g 置于10ml 离心试管中, 加入冰冷的10% PCA 2ml, 用玻璃棒搅拌, 离心, 取上清液. 沉淀部分再用冰冷的5% PCA处理2次. 合并三次上清液, 用10 mol/ L KOH 和1 mol / L KOH 中和至pH 为6.5, 沉淀部分离心除去, 用冰水洗涤沉淀, 最后用10 ml 容量瓶定容后放入- 20℃的冷冻室内保存待用。 　4、树脂的处理 取717 强碱型阴离子交换树脂100 g, 放入1 L 的烧杯中, 用300 ml 丙酮搅拌浸泡,滤去丙酮, 用去离子水洗净, 加入600 ml 1mo l/ L NaOH, 搅拌浸泡, 滤去碱液, 反复水洗至呈中性, 加入1 mol/ L 的HCl 溶液600 ml 搅拌浸泡, 滤去酸液, 多次水洗至呈中性, 最后一次连水一起灌入瓶内放入冰箱内冷藏备用. 5、柱子的制备 树脂柱采用0. 8×18 cm 玻璃柱, 底部用玻璃纤维垫底, 柱内装入树脂高度约8 cm,灌注时避免有气泡产生, 若有气泡混入, 可在柱内加入去离子水, 再用很细的玻棒搅拌除去气泡. 6、上柱操作 取2 ml 鱼肉提取液或0.1- 0.5 ml 浓度为10 mmol/ L 的标准样品溶液, 置于50 ml烧杯中, 用0.5 mol/ L 的氨水调节pH 值至9.4, 使之通过层析柱, 再在烧杯中用0.5 mol/L 氨水将少量去离子水调节pH 值至9.4, 同样使之通过层析柱. 当样品液下降至树脂上1 cm 左右时, 加入40 ml 去离子水, 去离子水流完后, 在柱下放上50 ml 容量瓶, 用量筒取0.001 mol/ L HCl 溶液( A 液) 45 ml , 加一部分到柱中, 然后接上分液漏斗加入剩下的A液. 待A 液流完后换上另一另50 ml 容量瓶, 同上操作, 加入0. 6 mol/ L NaCl- 0. 01mol / L HCl 溶液( B 液) 45 ml . 等A、B 液都洗脱完后, 将两容量瓶中的溶液分别用A 液、B液定容到50 ml, 用紫外可见分光光度计在250 nm 处分别测定其吸光度, 按下式计算K值. 7、结果计算 冷藏和冰藏水产品的质量指标测定 1、实验原理 挥发性盐基氮与动物性食品新鲜度的关系。 被检样品滤液与弱碱性氧化镁反应后，使被检样品中的碱性含氮物质游离，并被蒸馏出来，用吸收液吸收（含混合指示剂），再以标准酸液滴定，求其含量。 使游离、蒸馏